维药肉豆蔻体内抗肿瘤及其免疫调节作用的实验研究

　　肉豆蔻是肉豆蔻科植物肉豆蔻的种仁，原产马鲁古群--岛，我国台湾、云南、新疆等地均有引种，其主要含有松油4-烯醇、柠檬烯、冰片烯、三肉豆蔻酸甘油酯等化合物。药理学研究表明，肉豆蔻提取物对胃肠平滑肌具有轻度兴奋、抗炎、镇静等作用，但对肿瘤抑制作用的报道不多。因此，本实验旨在通过肉豆蔻醇提物对S180荷瘤小鼠的影响，初步证实其抗肿瘤作用，并探讨可能的机理。

　　l材料与方法

　　1.1仪器与试剂  Labconco冰冻真空干燥仪(法国乐高公司)，752分光光度计(中国伯乐公司)，J2-SH高速冰冻离心机(日本岛津公司)，X-512型显微镜(Leica公司)，肉豆蔻(和田维吾尔民族医院药房)，环磷酰胺、付品红、a一醋酸萘酯、甲基绿、无水乙醇(北京化学试剂公司)。

　　1.2肉豆蔻醇提物制备  1000g肉豆蔻加3倍量的95％乙醇，回流提取，在温度65℃-75℃条件下，提取3h反复3次，合并回收乙醇，浓缩提取物，制得浸膏。

　　1.3动物实验

　　1.3.1  动物模型建立将50只昆明种雄性小鼠(25 g~2.0 g)随机分为5组，每组10只。无菌条件下抽取接种7天生长良好的S180荷瘤小鼠腹水(活癌细胞数>96％)，用无菌生理盐水(v：v=l：4)稀释，按0.3 mL／只，小鼠左腋部皮下接种。接种24h后，分别对5组小鼠进行腹腔注射给药。分别为肉豆蔻高(30mg／kg)、中(20mg／kg)、低(10mg／kg)剂量组，阳性组给予环磷酰胺(20mg／kg)，模型组给予等量的生理盐水。连续给药2周。2周末处死称重后取小鼠瘤重，计算抑瘤率。同时，摘取胸腺、脾脏，计算脏器指数。

　　1.3.2肉豆蔻对小鼠外周血T淋巴细胞阳性率影响  采用ANEA法，最好给药24h后，尾部静脉取血，推片。血涂片自然干燥后，置于4℃甲醛一丙酮固定液中30s，流水冲洗30rain。待自然干燥，将固定干燥后的血涂片放入孵育染色液中，37℃条件下2h，取出后流水冲洗。干燥后，置1％的甲基绿溶液中复染30min。冲洗干燥后，油镜下计数500个淋巴细胞，算出T淋巴细胞的百分数。

　　1.4统计处理所有数据用均数±标准差(又±s)表示，用 SPSSl0.0统计软件进行统计，组间差异比较用单因素方差分析。p<0.01为有显著性差异。

　　2结果

　　2.1肉豆蔻对S180小鼠瘤重的影响  由表1可以看出，肉豆蔻对S180小鼠表现出不同的抑瘤作用。与模型组相比，肉豆蔻不同剂量醇提物组均表现出良好的抑瘤作用，具有显著性差异(p<0.01)。与环磷酰胺阳性组相比，肉豆蔻中、高剂量组抑瘤率略有升高，但无统计学意义。

　　2.2肉豆蔻对S180荷瘤小鼠胸腺、脾脏指数的影响  由表2可以看出，与模型组相比，肉豆蔻不同剂量组均明显可以·使胸腺、脾脏指数升高，具有统计学意义(p<0.01)，呈现一定的量效关系。与环磷酰胺阳性组相比，仅肉豆蔻高剂量组略有升高，但无统计学意义。

　　3讨论

   　 多年来动物实验与临床观察表明，恶性肿瘤的发生、发展都伴随着有机体免疫功能的降低，机体抗肿瘤的免疫反应主要包括细胞免疫和体液免疫，两者相互配合。胸腺是机体的中枢免疫器官，即免疫细胞产生、发育、分化、成熟的部位。脾脏是机体的外周淋巴器官，即成熟的淋巴细胞定居及对外来抗原发生免疫应答的场所四。T细胞是介导细胞免疫应答的主要免疫细胞，它在胸腺中发育成熟，同时也有辅助和增强体液免疫应答的功能。本实验表明肉豆蔻醇提物在体内对S180肉瘤的生长有一定的抑制作用，能够增加免疫器官的脏器指数、肿瘤抑制率，且明显增强$180荷瘤小鼠T淋巴细胞百分数，均说明肉豆蔻能够增强荷瘤小鼠的免疫功能而达到抗肿瘤的效果，但作用机理仍需进一步研究。

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