商陆科植物商陆(Phytolacca acinosa Roxb.)或垂序商陆(Ph,tolacca americana L.)的干燥根,是一种应用历史悠久的传统中蒙药,主产于河南、安徽、陕西、湖北等地,为各版中国药典收载的品种,其品名始载于《神农本草经》。本品有泻下逐水、散结消肿之功效;主治水肿胀满,二便不通,痴肿疮毒,痰饮癫痫。蒙医认为商陆具有杀“黏”,杀虫,消肿,止痛之功效,用于白喉,发症,炭疽,“黏”痧,脑刺痛,“亚玛”J1寸.胃肠虫症,牙痛,本品性昧苦寒有毒,古今文献记载,商陆小撼可兴奋血管运动中枢,使肾区血流增加而利尿,大剂量时能刺激胃肠道蠕动而引起腹泻。商陆毒素能引起中舷神经麻痹,呼吸运动障碍,语言不清,躁动,肌肉抽搐,严重者可出现心脏麻痹死亡,所以必须炮制好才能应用于临床、商陆的传统炮制方法很多,至清代以后在传统炮制的过程一般采用醋炙法。蒙医对商陆的炮制方法有其独特之处,常用的炮制方法为奶制和黑豆蒸制。
据文献报道,商陆根中主要成分是商陆皂苷,商陆皂苷具有祛痰、镇咳、平喘、抗炎、抗菌和抗病毒等多种药理作用。同时,商陆皂苷也是商陆的主要毒性成分。所以我们以商陆皂苷含量为指标探讨不同炮制方法对商陆皂苷含量和小鼠LD的影响。
1 实验材料
药品商陆(购于呼市福瑞大药房);实验动物昆明小鼠SCXK(蒙2002—0001)清洁型,内蒙古大学实验动物中心提供。
2不同炮制方法对商陆中商陆总皂苷含量的影响
2.1炮制样品的制备:①醋炙品:据2005版《中华人民共和国药典》对商陆的炮制法,取商陆饮片l0009,加入醋300nd,再加水l500ml,焖润4h。温火炒制60min,将炒至微干的商陆熟品放入温度为60℃的烘箱内烘90min,取出,自然晾干。②奶制品:根据参考文献,从牛奶炮制商陆的正交实验设计中最佳优化工艺制得:取商陆饮片10009,加入牛奶8009,浸泡4小时,烘干5.5h。③黑豆制品:根据参考文献,从黑豆炮制商陆的正交实验设计中最佳优化工艺制得:取商陆饮片10009,在笼屉里铺上两层用水浸湿的纱布,然后取浸泡好的黑豆25009和商陆生品铺在笼屉内,蒸制30min,将商陆取出,自然冷却,再放入温度为60。C的烘箱内烘5.Oh,取出自然晾干。
2.2实验方法及结果:标准曲线的绘制:精密称取在l20:干燥至恒重的商陆皂苷甲标准品约10.00mg,置10ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每lml中含商陆皂苷甲l.027m9的标准液)。精密量取商陆皂苷甲标准溶液30、60、90、120、150td分别置于具塞试管中,水浴加热除去甲醇。将试管置冰浴中.准确加8%香草醛乙醇液0.5ml和77%硫酸5.0ml,混匀。混和物置60℃恒温水浴中加热lorain后,立即在冰水浴中冷却15min,置比色池中,在300。700nm波长范围内进行扫描,测得最大吸收波长为500nm。以空白为对照,在500nm波长处测定吸收度,以吸收度对浓度作直线回归,得线性回归方程为:Y=0.00412X一0.0228(r=0.9995,n=5)。结果表明,浓度在0.03~0.15m9范围内吸收度与浓度呈良好线性关系。
样品液的制备:取适量商陆奶制品、黑豆炮制品、生品与醋制品至烘箱中烘干、粉碎,过20目筛,备用。精密称取商陆奶制品、黑豆炮制品、生品与醋制品粉末各约0.5009、分别置50ml锥形瓶中,加无水甲醇加热回流3次(40、30、30rid),每次1.5h,过滤,合并滤液,在水浴中加热至甲醇不再蒸出,残渣加蒸馏水20ml溶解,用乙醚取3次,每次20ml,合并正丁醇提取液,用水洗3次,正丁醇微热浓缩至干。残渣,溶于25ml甲醇中,即得样品液。
含糖测定:精密精取商陆奶制品、黑豆炮制品、生品与醋制品样品液各0.7ml分别置具塞试管中,按标准曲线下方法操作,在500nm处测定吸收度。
3商陆不同炮制品急性毒性LD30的测定
3.1样品液的制备:分别取商陆奶制品、黑豆炮制品、生品与醋制品各1O0g,加水600ml煎煮30min。滤过.滤渣再加水400ml煎煮30rmin,滤过,合并滤液,浓缩至100ml(样品液每毫升相当于1g原药材)。
3.2实验方法:取健康小鼠,体重18—22g,各半,采用腹腔注射给药(因灌胃给药难以求得)。按Bliss法,计算LD50.
实验结果表明,商陆经炮制后毒性有所降低,商陆经过炮制后由大到小的顺序依次是:商陆奶制品>商陆黑,豆制品>商陆醋制品>商陆生品。说明,商陆经奶制后毒性降低的程度优于黑豆炮制,商陆经奶制后,确实达到降低毒性,提高安全性的作用。
4讨论
上述研究资料表明:蒙药商陆毒性,奶制品<黑豆制品<醋制品<生品。说明:商陆经奶制后毒性降低的程度优于黑豆炮制品,商陆经奶制后,确实达到降低毒性,提高安全性的作用。根据上述实验结果得出如下结论:因为商陆皂苷既是有效成分也是商陆的主要毒性成分,商陆奶制后商陆皂苷含量较商陆生品有所下降,所以会出现毒性下降,疗效下降的情况。从而也验证了商陆经奶制后,达到了降低毒性,提高安全性的作用。
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