刘燕琴,胡开治, 肖波,谢贤明,刘杰
(重庆市药物种植研究所,重庆 408435)
南川百合Lilium rosthomii Diels为百合科百合属多年生草本植物,原产地为重庆南川市金佛山周围,海拔350一1 100m的山沟,溪边,林下,6-9月为开花期。其药用部分是干燥的肉质鳞片,具有养阴润肺,清心安神的功效。开花期长,花色呈红黄色、黄色,花型呈卷丹样,花被有紫色斑点,质感平滑,观赏价值极高。近年来,大量的野生资源被采挖,破坏,现存的资源已十分有限,急需进行人工保护和发展,否则将面临着灭绝的境地。但是,南川百合种子大量败育,而鳞茎的繁殖数量非常有限,这就大大阻碍了南川百合的繁殖发展。所以,运用组培方法研究南川百合的小鳞茎繁殖技术就显得十分必要。
1 材料
采摘于金佛山周围的林下,山沟的新鲜的材料。
2 方法
2.1鳞茎诱导小鳞茎的试验
取采下的新鲜鳞茎,去泥沙和腐烂的部位,在自来水下冲洗净,洗衣粉浸泡2h,流水冲洗1h,用75%的酒精浸泡30s,0.1%的升汞处理10min,再无菌水冲洗4次,最后用无菌纸吸干,以备用(以下的消毒方法相同)。
在超净工作台上,将鳞茎片切成O.5-1.0cm的小块,然后随机接种到培养瓶中,每组20瓶,每瓶一块。置于培养室内培养,培养条件:温度(25±2)℃.光照强度3000 lx,光周期为12h.d-1(下同)。
本试验以MS为基本培养基,通过附加不同浓度的NAA、6一BA、GA,设计了6组培养基。其编号、成分见表l。
2.2鳞片的不同部位诱导小鳞茎能力的试验
本试验按培养材料来源不同,设计了3个处理,将百合鳞片依照上述方法消毒后,将同一鳞片按上、中、下,3个部位切割,分别接种,每一处理50瓶,每一瓶接种3片。统一采用MS+NAA0.5mg.L-1+GA2.0mg.L-1+6一BA2.0mg.L-1培养基培养,培养条件同上。
3 结果
3.亚NAA, GA, 6一BA不同浓度配比对鳞片诱导小鳞茎的影响
培养8d后,从外植体近轴面基部出现启动迹象,形成一些淡绿色的小突起,随培养时间的延长,小突起为鳞茎样,进一步膨大成小鳞茎,为绿色带褐斑、簇生、形状规则。每块产生小鳞茎数目不一,少的1到2个,多的5到6个。培养60d进行统计,见表l。
由表l可知,无激素的MS培养基诱导作用最小,诱导率仅为18.7%,产生的小鳞茎数少。当培养基中存在NAA、6一BA、GA时,诱导作用明显增强,小鳞茎数也相应增加。当NAA固定为0.5mg.L-16一BA、GA浓度逐渐提高时,诱导率和小鳞茎数也逐渐上升。当6一BA。GA都为2.0mg.L-1时,诱导率达最高。在一定范围内,高浓度的激素促进鳞茎片的分化,但浓度过高时,促进作用减弱,甚至出现玻璃化现象。所以,选择出最适合小鳞茎诱导的培养基是MS+NAA0.5 mg.L-1+6一BA2.0mg.L-1+GA2.O mg.L-1.
3.2鳞片不同部位对小鳞茎诱导的影响
接种培养60d时统计,结果见表2。
从表2可知,同样在最佳培养基上培养,鳞片不同部位的诱导率差异极大,其中鳞片的下部诱导率最高,为92。5%;中部次之,为15.8%;上部最小,仅为5.0%。这和鳞片扦插时小鳞茎发生都集中在鳞片近轴面基部是一致的。分析原因,可能跟鳞片的内源激素的分布有关,也可能与不同部位的细胞生理化特性有关。
《中国现代中药》
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