精制大豆卵磷脂提取工艺的研究

　　1实验材料仪器：干燥箱，南京鑫长江制药设备有限公司。万能粉碎机：江阴市雨晨机械制造有限公司。超临界萃取设备：沈阳超临界萃取有限公司。试剂：95％乙醇、硅胶、氯仿、甲醇、乙醚均为分析纯，产地：北京化玻公司。原料：大豆(市售品)。

　　2方法

　　2．1超临界CO2萃取大豆油 经过试验得到的萃取工艺是：原料粒度80目；c02流量30k9／h；萃取压力25mPa；温度50°C，萃取时间150分钟。即取1．2kg大豆，置50°C干燥箱中干燥4小时，用万能粉碎机粉碎，过80目筛，取粉末按上述工艺条件进行萃取。萃取大豆油后剩下的残渣进行大豆卵磷脂的提取精制实验。

　　2．2大豆磷脂提取确定提取溶剂为95％乙醇，固液比为1：1：5。即取萃取大豆油后剩下的残渣1kg，加95％乙醇1500ml，不断搅拌下浸提4小时，抽滤，真空浓缩萃取液得浅黄色蜡状物。

　　2．3柱层析法分离大豆卵磷脂色谱柱的制备：分离用色谱柱为60mm×l000mm玻璃柱。称取5009硅胶用氯仿作为溶剂湿法装柱(硅胶体积为<1：g)Omm×420ften)，装好后备用。上样和洗脱：将大豆磷脂溶于少量氯仿一甲醇混合液后倒人少量硅胶中，加热至溶剂挥干后上样。洗脱剂的选择：参照文献方法，采用梯度差为(10：1)一(2：1)-(1：2)氯仿一甲醇混合液进行梯度洗脱，最后用甲醇洗脱。流速为15ml／min，每lOOml收集1瓶，共收90瓶，分别用薄层层析检测，合并相同的成分，回收溶剂至干。

　　3结果   

　　3．1洗脱溶剂用量氯仿一甲醇(10：1)：1800ml、(2：1)3900ml、(1：27)1700ml、(0：1)2700ml，收集的成分粗分为9份，其中第7份(28—53瓶)、第8份(54～73瓶)和第9份(74～90瓶)与大豆卵磷脂对照品基本一致。

　　3．2分离产物的精制将通过柱层析分离得到的第7、第8和第9部分，分别加乙醚溶解处理2次(产品的25倍量乙醚)，取乙醚溶液，回收乙醚，残渣加95％乙醇溶解处理(反复溶解，离心)，取乙醇溶液，减压浓缩并干燥，即得精制产品。7号得大豆卵磷脂粗品3．749，精品2．359；8号得粗品4．499，精品未得到；9号得粗品4．479，精品3．239(注：因实验过程中难免有损失，如果试验量多，产品得率会提高)。

　　4结论　大豆卵磷脂的提取精制工艺为：取大豆，置50°C干燥箱中干燥4小时，用万能粉碎机粉碎，过80目筛，以c02流量30k9／h，萃取压力25mPa，温度50°，萃取时间150分钟为超临界萃取条件萃取大豆油。萃取大豆油后剩下的残渣中加入1：1．5固液比的95％乙醇，不断搅拌下浸提4小时，抽滤，真空浓缩萃取液得粗大豆磷脂。将大豆磷脂上硅胶柱(硅胶：大豆=1：2)，采用梯度差为(10：1)-(2：1)-(1：2)-一(0：1)的氯仿-甲醇混合液进行梯度洗脱，用薄层层析检测(与对照品进行比较)，合并相同的成分，回收溶剂至于，再进行乙醚和乙醇处理即可。

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