三七总皂甙提取工艺研究进展

　　三七总皂甙(PNs)(又称三七总皂苷)，为五加科人参属植物三七根部提取的有效成分，它含有人参皂甙Rbl、Rb2、Rc、Rd、Re、Pd、Rgl、R92、Rh，三七皂甙Rl、R2、R3、R4、R5、R6等20多种皂甙成分，其中以人参皂甙Rbl、Rgl，三七皂甙Rl含量最高。三七总皂甙对中枢神经系统有明显的抑制作用和镇痛作用。在生产中由于不同的提取方法，其有效成分的含量也会出现差别，为了制剂的有效性，现特将其提取工艺的研究进展综述如下。

　　1有机溶剂提取法

　　三七总皂甙的提取最常用的方法是使用有机溶剂进行提取。常使用的有机溶剂有：甲醇、乙醇、石油醚、氯仿等。

　　1．1甲醇提取

　　1．1．1冷浸法潘旭初采用本法取三七粗粉0．59，加水约5滴，搅匀，再加以水饱和的正丁醇5 mL，密塞，振摇约10min，放置2 h，离心，取上清液，加以正丁醇饱和的水3倍量，摇匀，放置使分层(必要时离心)。取正丁醇层，置蒸发皿中，蒸干残渣加甲醇l mL使溶解，得人参皂甙Rgl、Rbl及三七皂甙Rl。1．1．2加速溶剂提取法李鹏[31等应用加速溶剂提取法提取三七皂苷类成分过程中，以三七总皂苷、人参皂苷Rbl和人参皂苷R9含量为指标，用单因素考察法对影响加速溶剂提取三七皂苷类成分的因素进行优化。优选出三七皂苷类成分加速溶剂提取的最佳条件为：以甲醇为溶剂，药材粒径为0．30—0．45 mm，提取温度150℃，提取压力6．895 MPa，提取15 min，提取l次。结果表明与索氏提取相比，提取率相当，但能明显地缩短提取时间和溶剂用量，同时重现性也有明显的改善，原因可能是样品的前处理更为简单。

　　1．2乙醇提取

　　1．2．1渗漉法闫光军等采用渗漉法，采用三七中粉，用15倍量的75％乙醇润湿2 h后装柱，浸泡l2 h。最后以5 mL／min的速度渗漉。采用本法提取的渗漉液其三七总皂苷含量平均为10．25％，提取率为93．1％。

　　1．2．2浸渍法瞿林海等选用过8目筛的三七粉，用l0倍量的70％乙醇提取3次，每次1．5 h，所得三七总皂甙为(87．54±3．16)m以生药，提取率大于96％。

　　1．2．3热回流提取法罗晓健旧等采用热回流法，提取溶剂用量为药材用量的13倍，乙醇浓度为30％，提取温度为70℃，加热时间为40min，同法提取两次，三七总皂甙的平均提取率为94．92％。本方法提取率高，生产成本低，适宜工业生产。

　　1．2．4罐组逆流提取法  陈勇等同建立了罐组逆流提取工艺参数的多指标综合优化方法，并成功运用于三七总皂甙等类活性成分的提取，得到三七罐组逆流提取最佳工艺条件为体积分数为70％乙醇、8倍药材量溶剂、阶段提取时间为30 rain、提取温度50℃。

　　1．2．5水煎醇沉法唐红芳等将三七粉碎成粗粉(20—40目)，用10倍量、5倍量的水煎煮两次(分别煎煮60、30 min，保持微沸)，冷却后，离心分离，合并上清液，浓缩至1倍量体积。加人选定倍量的不同浓度乙醇，搅拌，静置，待沉降完全后，离心，取上清液，并加适量水至总量为选定倍量即可。

　　1．2．6展筋乳剂法杜志谦等采用正交试验，以浸膏得率和三七总皂甙含量考察醇提工艺条件，其最佳工艺为药材用5倍量60％乙醇提取3次，每次1h，共提取3批，结果平均浸膏得率26．5％．三七总皂甙平均含量17．28 m9／g。

　　1．3石油醚提取潘旭初称取三七粉末(40目)1．009，置50 mL锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，摇匀，室温冷浸36 h(24 h后振摇15 min)。离心，精密吸取上清液2 mL，挥发去甲醇，残渣加蒸馏水2 mL溶解，用石油醚提取(10 mLx2)，合并石油醚层，用少量蒸馏水洗，水层与洗液合并，在水浴上浓缩至近1 mL，将浓缩液加到净化柱中，俟液面降至棉花层后即逐毫升加蒸馏水，共加lo mL，柱流出液流速为0．4 mL／min，弃去水液，继续用70％乙醇15 mL洗脱，收集乙醇溶液，置水浴上蒸干，残渣用甲醇分次溶人2 ml』容量瓶中，放置过夜，添加甲醇至刻度，摇匀，精密吸取上清液，置具塞试管中，挥发去溶剂，加新配制的5％香草醛一冰醋酸溶液0．2 mL，高氯酸0．8 mL，置60℃水浴中加热15 min，流水冷却，加冰醋酸5 mL，摇匀．可得三七总皂甙。

　　1．4氯仿提取潘旭初青密称取三七总皂甙适量，加入25倍量含7％盐酸的50％乙醇溶液，加热回流4 h，放冷，水解液用蒸馏水稀释至原体积的1．5倍，蒸去乙醇，母液用氯仿提取4—6次，氯仿提取液合并，过滤，回收氯仿即得三七总皂甙。

　　2酶提取法

　　酶提取法一般选用纤维素酶和果胶酶，因为纤维素酶能水解结构致密的植物细胞的细胞壁，提取时能显著提高三七提取液的皂甙含量。而果胶酶主要是对提取物的得率有较大影响。李元波等将冷浸法和酶解法结合，分别采取以下几种酶解法进行提取，现介绍如下。

　　2．1  纤维素酶解法取三七粉109，加入50 mL蒸馏水冷浸24 h，以每克生药加入15 mL的量加入纤维素酶，调节pH4．5，于50℃水浴酶解2 h，酶解期间时时搅拌，酶解后过滤，药渣加入70％的乙醇回流两次，过滤，合并滤液，定容至200 mL可。提取皂甙含量为9．23％，提取物得率为28．07％。

　　2．2果胶酶解法取三七粉109，加入50 mL蒸馏水冷浸24 h，以每克生药加入140 U的量加入果胶酶，余下操作同纤维素酶解法，合并滤液，定容至200 mL备用。提取皂甙含量为8．9％，提取物得率为34．59％。

　　2．3复合酶解法取三七粉109，加入50 ml馏水冷浸24 h，以每克生药加入15 u纤维素酶、70 u果胶酶的量加入复合酶，余下操作同纤维素酶解法，合并滤液，定容至200 mL备用。提取皂甙含量为11．17％，提取物得率为32．43。

　　3超声波提取法

　　3．1超声波提取法刘旭等将三七粉碎成粗老)，加入75％乙醇，浸泡约12 h，超声30 min，共3次，滤过，收集合并滤液，减压浓缩，真空干燥。   

　　3．2双频超声法贲永光等采用双频超声(40 kHz／25 kHz)技术对三七总皂甙提取进行强化，选用80％的乙醇，超声作用时间为30 min，料液比为1：20，提取温度为40℃，在这个最佳条件下试验，三七总皂甙提取率为82．41％。

　　3．3超声酶法周琳在pH为4．5，酶解温度为50℃，酶解时间为2．5 h条件下，纤维素酶用量为15U／g(生药)、果胶酶用量为140 u／g(生药)，超声时间为90 min，加水量为8倍量。结果所得三七提取液中总皂甙的含量为10．33％，提取物得率为35．17％，表明超声酶法操作简便，工艺条件稳定。

　　4微波法

　　郭子杰以三七为研究对象，应用正交实验法，研究了微波对三七中皂苷浸取作用的影响效果。结果表明：80％甲醇是较理想的提取溶剂，并且微波强化浸取的最佳工艺条件为：辐射功率600W、辐射时间10min、料液比1：40经过微波处理后，三七中皂苷物质的浸取速度至少是未经微波处理的4倍，因此提取效率得到了较大的提高。

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