木瓜不同软化方法的比较
核心提示：修彦凤 ，张 磊 ，王 平
(1．上海中医药大学中药学院，上海 201203； 2．上海德华国药制品有限公司，上海 201400)
木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai的干燥近成熟果实。性味酸温，归肝脾经，具有平
(1．上海中医药大学中药学院，上海 201203； 2．上海德华国药制品有限公司，上海 201400)
木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai的干燥近成熟果实。性味酸温，归肝脾经，具有平
修彦凤 ，张 磊 ，王 平
(1．上海中医药大学中药学院，上海 201203； 2．上海德华国药制品有限公司，上海 201400)
木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai的干燥近成熟果实。性味酸温，归肝脾经，具有平肝舒筋、和胃化湿的功能，用于湿痹拘挛，腰膝关节酸重疼痛，吐泻转筋，脚气水肿。《中国药典》2005年版一部规定木瓜的炮制方法为：洗净，润透或蒸透后切薄片，晒干。木瓜质地坚硬，水份不易渗入，故需润透或蒸透：以利于切制。那么，润法和蒸法对成分有何影响，本文以总有机酸、总黄酮和齐墩果酸为指标对其进行了考察。
1 器材
1．重 仪器Agilent重100型高效液相色谱仪、Agilent 8453E紫外．可见光光谱系统，美国惠普公司；PHB-2便携式pH计，上海三信仪表厂。
1．2 材料木瓜药材：购于上海华宇药材公司，产地为浙江，经鉴定为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai的干燥近成熟果实。对照品：齐墩果酸(批号：0709-9803)、芦丁(批号：0080-9705)，均购自中国药品生物制品检定所。试剂：甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2方法和结果
2．1 样品制备
2．1．重 木瓜原药材取木瓜药材500 g，大小分档，挖去瓜瓤，80℃烘干。
2。1．2 润制木瓜取木瓜药材500 g，大小分档，洗净，略浸，捞出，至润制容器中，上面覆盖湿布，润2 d(每天洒水4次)，润透，切薄片，80℃烘干，筛去脱落的瓜瓤。
2．1．3 蒸制木瓜取木瓜药材500 g，大小分档，洗净，略浸，捞出，至蒸制容器中蒸制2 h，趁热切薄片，80℃烘干，筛去脱落的瓜瓤。
2．2 总有机酸的含量测定(真)参考《中国药典》山楂项下方法测定：将3种规格的药材或饮片粉碎过5号筛。取细粉约1 g，精密称定，精密加入水100 mI，室温下浸泡4 h，时时振摇，滤过，精密量取滤液25 ml，加水50 mI，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液(0．1 mol／L)滴定，即得。每毫升氢氧化钠滴定液(O．1 mol／L)相当于6．404 mg的枸橼酸。3种不同规格的木瓜中总有机酸的含量测定结果见表l(按干燥品计算)。
2．3 总黄酮的测定
2．3．1 对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的芦丁对照品9．9 mg，置25 mI量瓶中，加入甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得。
2．3．2 标准曲线的制备精密量取对照品溶液O，0。1，0。2，O．4，0．6，0．8，1．0，1．2，1．6 ml，分别置10 ml量瓶中，各加水至2．4m1，加5％的亚硝酸钠溶液0．4 ml，使混匀，放置6 min，加10％硝酸铝溶液0．4 mI，摇匀，放置6 min，加氢氧化钠试液4 ml，再加水至刻度，摇匀，放置15 min，照紫外分光光度法，在500 nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为r：11．998 6X，r=0．998 5，芦丁对照品溶液的浓度为O。003 96一O．633 6 m旷ml的范围内，与吸光度呈良好线性关系。
2．3。3 含量测定取细粉约O．5 g，精密称定，加甲醇50 ml，加热回流1 h，放冷，滤过，残渣加甲醇25 ml，加热回流0．5 h，放冷，滤过，合并两次滤液，置10 ml量瓶中，加甲醇稀释，并定容至刻度，摇匀，即得。精密移取0．5 ml，置10 mⅡ量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“各加水至2．4 ml"起依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含无水芦丁的重量，计算，即得3种不同规格的木瓜中含总黄酮以无水芦丁计的结果(按干燥品计算)。见表1。
2．4 齐墩果酸的含量测定
2．4。重 色谱条件色谱柱为Kromasil C．8柱(4．6 mm×25 em，5μm)；流动相为甲醇．水(9：1)；检测波长210 nm；流速1．O ml／min；柱温25℃。
2．4．2 标准曲线的制备精密称取齐墩果酸对照品5。6 mg，用甲醇定容于10 ml。分别精密移取O．Ol，O．05，O．l，0．2，O．4，O．6，0．8 ml对照品溶液至1 ml的量瓶中，用甲醇定容至刻度，进样20l分析，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程为r=μ8 591．78X一8．95，r=0．999 9，浓度在0．005 6~0．448 mg/ml范围内，与峰面积呈良好的线性关系。
2。4．3 精密度的测定取浓度为0．112 mg/ml的对照品溶液，进样20 μ1分析，连续进样5次，测定峰面积，计算求得峰面积的RSD为0．77％，说明精密度良好。
2。4．4 稳定性实验取木瓜供试品溶液，分别在O，2，4，8，12，24h测定齐墩果酸的峰面积，RSD为2．07％，表明样品在24 h内稳定。
2．4．5 重复性实验按照供试液的制备方法，平行制备5份，进样分析，计算求得含量的RSD为1．83％，说明重复性良好。
2．4．6 加样回收率实验精密称取已知齐墩果酸含量的药材样品6份，分别精密加入齐墩果酸，采用外标两点法进行测定，计算平均加样回收率为100。15％，RSD为1．83％。
2．4．7 含量测定取细粉约1 g，精密称定，加甲醇50 mI，加热回流1 h，放冷，滤过，残渣加甲醇25 ml，加热回流0．5 h，放冷，滤过，合并两次滤液，浓缩，置lO ml量瓶中，加甲醇稀释，并定容至刻度，摇匀，即得。经微孔滤膜滤过，进样分析，结果见表1(按干
燥品计算)。
2．5 酸度的测定取本品粉末5 g，加水50 ml，振摇，放置1 h，滤过，滤液依法测定，原药材、润法和蒸法所得饮片的pH测定值均为3．1。
3 讨论
由表]可以看出，与原药材比较，木瓜经过润法、蒸法软化，各成分变化不大，润法样品略有下降，可能上是在润制淋水的过程中，损失少量成分；蒸法样品中的成分含量略高，可能是在高温加热的过程中，少量有机酸、黄酮类成分、齐墩果酸从结合状态游离出来。综合分析，两种方法软化的木瓜中成分没有显著性差异，润法需要的时间较长，蒸法工时较短，但需要消耗能量，各厂家可以根据需要选择相应的软化方法。
另外，本文建立了木瓜中齐墩果酸的含量测定方法，样品制备简便，方法重现性好，回收率高，值得推广。
《时珍国医国药》
(1．上海中医药大学中药学院，上海 201203； 2．上海德华国药制品有限公司，上海 201400)
木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai的干燥近成熟果实。性味酸温，归肝脾经，具有平肝舒筋、和胃化湿的功能，用于湿痹拘挛，腰膝关节酸重疼痛，吐泻转筋，脚气水肿。《中国药典》2005年版一部规定木瓜的炮制方法为：洗净，润透或蒸透后切薄片，晒干。木瓜质地坚硬，水份不易渗入，故需润透或蒸透：以利于切制。那么，润法和蒸法对成分有何影响，本文以总有机酸、总黄酮和齐墩果酸为指标对其进行了考察。
1 器材
1．重 仪器Agilent重100型高效液相色谱仪、Agilent 8453E紫外．可见光光谱系统，美国惠普公司；PHB-2便携式pH计，上海三信仪表厂。
1．2 材料木瓜药材：购于上海华宇药材公司，产地为浙江，经鉴定为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai的干燥近成熟果实。对照品：齐墩果酸(批号：0709-9803)、芦丁(批号：0080-9705)，均购自中国药品生物制品检定所。试剂：甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2方法和结果
2．1 样品制备
2．1．重 木瓜原药材取木瓜药材500 g，大小分档，挖去瓜瓤，80℃烘干。
2。1．2 润制木瓜取木瓜药材500 g，大小分档，洗净，略浸，捞出，至润制容器中，上面覆盖湿布，润2 d(每天洒水4次)，润透，切薄片，80℃烘干，筛去脱落的瓜瓤。
2．1．3 蒸制木瓜取木瓜药材500 g，大小分档，洗净，略浸，捞出，至蒸制容器中蒸制2 h，趁热切薄片，80℃烘干，筛去脱落的瓜瓤。
2．2 总有机酸的含量测定(真)参考《中国药典》山楂项下方法测定：将3种规格的药材或饮片粉碎过5号筛。取细粉约1 g，精密称定，精密加入水100 mI，室温下浸泡4 h，时时振摇，滤过，精密量取滤液25 ml，加水50 mI，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液(0．1 mol／L)滴定，即得。每毫升氢氧化钠滴定液(O．1 mol／L)相当于6．404 mg的枸橼酸。3种不同规格的木瓜中总有机酸的含量测定结果见表l(按干燥品计算)。
2．3 总黄酮的测定
2．3．1 对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的芦丁对照品9．9 mg，置25 mI量瓶中，加入甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得。
2．3．2 标准曲线的制备精密量取对照品溶液O，0。1，0。2，O．4，0．6，0．8，1．0，1．2，1．6 ml，分别置10 ml量瓶中，各加水至2．4m1，加5％的亚硝酸钠溶液0．4 ml，使混匀，放置6 min，加10％硝酸铝溶液0．4 mI，摇匀，放置6 min，加氢氧化钠试液4 ml，再加水至刻度，摇匀，放置15 min，照紫外分光光度法，在500 nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为r：11．998 6X，r=0．998 5，芦丁对照品溶液的浓度为O。003 96一O．633 6 m旷ml的范围内，与吸光度呈良好线性关系。
2．3。3 含量测定取细粉约O．5 g，精密称定，加甲醇50 ml，加热回流1 h，放冷，滤过，残渣加甲醇25 ml，加热回流0．5 h，放冷，滤过，合并两次滤液，置10 ml量瓶中，加甲醇稀释，并定容至刻度，摇匀，即得。精密移取0．5 ml，置10 mⅡ量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“各加水至2．4 ml"起依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含无水芦丁的重量，计算，即得3种不同规格的木瓜中含总黄酮以无水芦丁计的结果(按干燥品计算)。见表1。
2．4 齐墩果酸的含量测定
2．4。重 色谱条件色谱柱为Kromasil C．8柱(4．6 mm×25 em，5μm)；流动相为甲醇．水(9：1)；检测波长210 nm；流速1．O ml／min；柱温25℃。
2．4．2 标准曲线的制备精密称取齐墩果酸对照品5。6 mg，用甲醇定容于10 ml。分别精密移取O．Ol，O．05，O．l，0．2，O．4，O．6，0．8 ml对照品溶液至1 ml的量瓶中，用甲醇定容至刻度，进样20l分析，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程为r=μ8 591．78X一8．95，r=0．999 9，浓度在0．005 6~0．448 mg/ml范围内，与峰面积呈良好的线性关系。
2。4．3 精密度的测定取浓度为0．112 mg/ml的对照品溶液，进样20 μ1分析，连续进样5次，测定峰面积，计算求得峰面积的RSD为0．77％，说明精密度良好。
2。4．4 稳定性实验取木瓜供试品溶液，分别在O，2，4，8，12，24h测定齐墩果酸的峰面积，RSD为2．07％，表明样品在24 h内稳定。
2．4．5 重复性实验按照供试液的制备方法，平行制备5份，进样分析，计算求得含量的RSD为1．83％，说明重复性良好。
2．4．6 加样回收率实验精密称取已知齐墩果酸含量的药材样品6份，分别精密加入齐墩果酸，采用外标两点法进行测定，计算平均加样回收率为100。15％，RSD为1．83％。
2．4．7 含量测定取细粉约1 g，精密称定，加甲醇50 mI，加热回流1 h，放冷，滤过，残渣加甲醇25 ml，加热回流0．5 h，放冷，滤过，合并两次滤液，浓缩，置lO ml量瓶中，加甲醇稀释，并定容至刻度，摇匀，即得。经微孔滤膜滤过，进样分析，结果见表1(按干
燥品计算)。
2．5 酸度的测定取本品粉末5 g，加水50 ml，振摇，放置1 h，滤过，滤液依法测定，原药材、润法和蒸法所得饮片的pH测定值均为3．1。
3 讨论
由表]可以看出，与原药材比较，木瓜经过润法、蒸法软化，各成分变化不大，润法样品略有下降，可能上是在润制淋水的过程中，损失少量成分；蒸法样品中的成分含量略高，可能是在高温加热的过程中，少量有机酸、黄酮类成分、齐墩果酸从结合状态游离出来。综合分析，两种方法软化的木瓜中成分没有显著性差异，润法需要的时间较长，蒸法工时较短，但需要消耗能量，各厂家可以根据需要选择相应的软化方法。
另外，本文建立了木瓜中齐墩果酸的含量测定方法，样品制备简便，方法重现性好，回收率高，值得推广。
《时珍国医国药》
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