抗衰老胶囊对衰老模型小鼠血清

　　抗衰老胶囊在临床已应用多年，但其作用机制至今仍未阐明。前期实验表明,抗衰老胶囊具有良好地增强学习记忆功能的作用。本文采用D一半乳糖致亚急性衰老小鼠模型研究抗衰老胶囊的抗衰老作用，目的在于初步探讨其作用机制。

　　1、 材料和方法

　　1.1动物昆明种成年小鼠60只，体重(30±2)g，雌雄各半，由黑龙江中医药大学动物实验中心提供，合格证：黑动字第P00101006号。动物随机分组，在22～27~C，相对湿度50％一70％的环境中，自由饮水、进食，每周称重1次。

　　1.2主要药品与试剂

　　抗衰老胶囊(人参、熟地黄、天门冬、丹参、生山楂等中药组成)由黑龙江中医药大学自制，以灭菌蒸馏水配成lg·ml一溶液，置4~C冰箱储存备用；D一半乳糖(上海试剂二厂)，用灭菌生理盐水配成5％浓度；阳性对照药维生素E(广州星群药业)，以蒸馏水振荡配成0.1％的混悬液；超氧化物歧化酶(sOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)检测试剂盒为南京建成生物工程研究所产品。

　　1.3仪器

　　低温超速离心机(德国贝克曼公司)；分析天平(梅特勒一托利多仪器有限公司)；722可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)；电热鼓风干燥箱(上海福玛实验设备有限公司)；电热恒温培养箱(上海福玛实验设备有限公司)。

　　1.4方法

　　1.4.1给药方法与剂量

　　动物称重，随机分为六组，抗衰老胶囊组给予2.08g·kg-1、1.04g··kg-1、0.52g··kg-1的抗衰老胶囊溶液；vitE组给予0.0078g·kg-1维生素E；模型组给予等体积生理盐水，灌胃给药，每天1次，并同时颈背部皮下注射5％的D一半乳糖0.5mll2；空白组给予同体积的灭菌生理盐水，连续给药6周，每周记录1次体重，并随时观察动物的生长情况。

　　1.4.2血清的制备与生化指标的测定给D一半乳糖及受试药6周后，小鼠摘除眼球取血，摘取小鼠眼球取血约1ml，放人离心机中，以3000r.min-1离心15min，分离出血清口]。SOD的测定，采用黄嘌呤氧化酶法，按照谷胱甘肽过氧化物酶试剂盒的说明测定血清GSH—Px的活性，具体步骤严格遵循试剂盒说明书进行。

　　1.5数据处理实验数据用(x(_)±s)表示，组间比较采用t检验判定差别。

　　2、 实验结果

　　模型组血清SOD及GSH—Px活性明显低于空白组(P<O.0l，P<O.05)，给予抗衰老胶囊2.08g·kg-1、1.04g·kg-1、0.52g·kg-1后，均能使衰老小鼠血清SOD及GSH—Px活性显著回升(P<0.0l，P<0.05)，但量效关系不甚明显，提示抗衰老胶囊能增强衰老小鼠体内抗氧化酶活性，有利于清除自由基，结果见表1。

　  表1   抗衰老胶囊对小鼠血清SOD含量的影响(x(_)±s)

高剂量组       10           2.08            315.47±43.42^**

中剂量组       lO           1.04            310.02±65.56^**

低剂量组       10           0.52            326.53±96.67^*

viTE组        lO       　 O.0078            279.16±38.02^*

模型组         10         等体积            224.08±60.65^△

　　注：*与模型组比较，P<0.05；**与模型组比较，P<0.01；▲与空白组比较，P<0.05。

  表2 　 抗衰老胶囊对小鼠血清GSH—Px含量的影响(x(_)±s)

高剂量组    10          2.08             281.73士66·56^*

中剂量组    10          1.04             284.42±56.30^*

低剂量组    10          O.52             278.93±67.3l^*

vitE组    　lO         0.0078            292.32±72.82^*

模型组   　 10         等体积            218.67±59.36^▲▲

　　注：*与模型组比较，P<0.05；**与空白组比较，P<O.0l。

　　3、 讨论

　　衰老是分子、细胞、器官功能乃至整个功能衰退的综合复杂的生理、病理变化过程，机体在细胞代谢过程中不断产生自由基，具有极强的氧化能力，能使机体内多种生物大分子变性、断裂，引起细胞结构和功能的破坏，而导致机体的衰老。机体内存在多种老化相关酶如SOD、GSH—Px、CAT、MAO等，其中SOD、GSH— Px、CAT相互协调来清除自由基，减少LPO的产生，所以从这个意义上讲，能提高抗氧化酶活性的药物即具有抗衰老作用。

　　D-半乳糖致亚急性动物模型对自由基损伤和免疫指标的变化与人体衰老指标改变规律基本一致，它造成拟衰老的根本原因也是在代谢过程中形成过量的自由基过氧化反应，所以本实验选择D-半乳糖复制衰老小鼠模型。

　　目前，临床上常用的预防和治疗衰老的药物作用大多过于单一，不能全面改善机体的衰老体征，而中药则因其能从综合调理的高度增强人体机能、提高抗病能力而越来越受到人们的青睐。抗衰老胶囊由人参、熟地黄、天门冬、丹参、生山楂等组成，实验证明其能够增强动物的学习记忆能力，提高抗氧化酶活性，提示它在延缓老化方面有良好的作用。本实验只为抗衰老胶囊的抗衰老作用提供了一定的依据，其他如DNA损伤、免疫功能影响等方面还需要进一步研究，以弥补单一酶生化测定的不足。

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