大枣多糖对小鼠脾脏组织结构的影响

　　1材料与方法

　　1.1药品与试剂　　大枣：市购，产地：山西稷山。环磷酰胺：江苏恒瑞医药股份有限公司，批号06022221。乙醇，二甲苯，石蜡。

　　1.2动物小鼠70只。昆明系鼠，体重20-24g，雌雄各半；由动物科学学院实验动物中心提供。

　　1.3主要仪器离心机：上海安亭科学仪器厂。隔水式电热恒温培养箱：上海安亭科学仪器厂。半自动生化分析仪：华珊集团。FA-1004电子天平：上海天平仪器厂。0lympus CH30型光学显微镜。

　　1.4大枣多糖的制备　　精选大枣放于烘箱中，温度60℃烘干至恒重，机械粉碎。称取适量大枣粉按料水比l：10进行调配，在90℃水浴锅中，每5小时抽取l次，共3次；合并滤液浓缩至适量，加入95％乙醇使含醇量达80％，静置、离心。收集多糖沉淀，用丙酮洗涤数次。用蒸馏水溶解沉淀，再加入正丁醇和三氯甲烷(1：1)的混合液萃取振荡数次，分离下层蛋白，收集上清液，在上清液中加入活性炭适量煮30分钟脱色，抽滤即得精制大枣多糖，含量为52.30mg/ml。

　　1.5实验设计随机选择40只体重20-24g的健康小鼠，分为4组，每组lO只。即：空白对照组(E1服自来水)，高中低剂量组分别口服16、8、4g·kg-1大枣多糖，共4周。

　　1.6样品采集与处理实验结束时，小鼠脱臼处死。立即解剖取脾脏，置于Bouin液常温固定24小时，梯度乙醇脱水，二甲苯透明。石蜡包埋，莱卡切片机切片5-8，HE染色，中性树胶封片，光镜观察并记录各组脾脏组织结构的变化特点。

　　2结果　

　　空白组脾动脉周围淋巴鞘、鞘内淋巴细胞、边缘区脾小结、生发中心、脾小结内淋巴细胞数目、边缘区、脾索、脾窦没有明显变化。小剂量组较正常组变化不明显。中剂量组脾动脉周围淋巴鞘较厚，鞘内淋巴细胞越来越比较密集；脾小结较多、较大，生发中心较明显，小结内淋巴细胞数目较多；边缘区较厚；脾索比较宽。细胞较疏松，脾窦变宽。高剂量组脾动脉周围淋巴鞘明显增厚，鞘内淋巴细胞越来越密集；脾小结增大增多，生发中心明显，小结内淋巴细胞数目多；边缘区增厚；脾索增宽，细胞疏松，脾窦增宽。

　　3讨论

　　大枣为鼠李科植物枣(Ziziph jujuba MILL.)的成熟果实，具有中益气、养血安神、抗癌及健脾强身等功效，近代药理研究表明，大枣具有抗变态反应，中枢神经抑制，保肝、增强肌力及抑制癌细胞的增殖等作用，对治疗肝炎、降血压、医毒疮、补血、健脑、抗癌及健脾强身等具有特殊的效果。大枣多糖是大枣中重要的生物活性物质，可作为免疫促进剂，具有增强巨噬细胞吞噬功能，促进淋巴细胞转化、免疫兴奋和抗衰老、补血及保护肝脏等作用。

　　脾脏是最大的外周免疫器官，分为白髓、边缘区、红髓，是T、B淋巴细胞聚集的部位，也是产生致敏淋巴细胞和抗体的场所之-，并能清除衰老细胞和微生物等，其中T细胞、B细胞及巨噬细胞在机体的防御和清除功能中有重要的作用。白髓动脉周围淋巴鞘有大量的T细胞、少量巨噬细胞、交错突细胞等构成，它是鞘内T细胞迁出脾的重要通道；脾小结主要是B细胞，健康动物脾内脾小结较少，当受到抗原刺激引起体液免疫应答时，脾小结增多增大；边缘区细胞排列较琉松，主要含有B细胞也含其他细胞，它是脾内免疫细胞捕获、识别、处理抗原和诱发免疫应答的重要部位；脾索内含T细胞、B细胞、浆细胞、巨噬细胞和其他血细胞。当体液免疫应答时，淋巴小结增多增大。脾索内浆细胞增多；细胞免疫应答时，动脉周围淋巴鞘显著增厚。脾内滤血的主要部位是在脾索和边缘区；脾窦和脾索内可以储存一定量的血液。

　　本实验结果表明随着大枣多糖剂量的增加，脾中央小动脉周围的淋巴鞘逐渐增厚，鞘内淋巴细胞越来越密集，边缘区脾小结逐渐增大、增多。生发中心越来越明显，脾小结内淋巴细胞数目逐渐增多，边缘区也逐渐增厚，此外，随着大枣多糖剂量的增加，脾索逐渐增宽，细胞逐渐疏松，脾窦也逐渐增宽，表明大枣多糖对正常小鼠脾脏组织结构和免疫功能有促进作用。提示大枣多糖对免疫抑制小鼠免疫功能有显著提高的作用。

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