五昧子炮制品对急性肝损伤的治疗作用研究

　　本实验通过不同五味子炮制品对小鼠由CCl4、对乙酞氨基酚(APAP)，D-氨基半乳糖(D—Gal)引起的急性肝损伤的保护作用进行研究，来证明科学的解释古人“人嗽药生用。入补药熟用”“醋制人肝经”的五昧子炮制理论。

　　1实验材料

　　1.1  实验样品与试剂  生五味子：取原药材，除去杂质及果柄，洗净，干燥。醋制五味子：按照最佳炮制工艺制备。酒制五味子：按照最佳炮制工艺制备。五味子生品水煎液：取上述五味子100g，分两次煎煮，第一次加6倍体积的水煎煮，第二次加3倍体积的水煎煮，合并水煎液并浓缩至100mL溶液，备用。五味子酒制水煎液：同上。五味子醋制水煎液：同上。谷丙转氨酶试剂盒：北京北化精细化学品有限责任公司，批号050623。

　　1.2实验动物  昆明种小鼠，雌雄各半，体重20±2g，由四川大学实验动物中心提供。

　　1.3仪器40lO半自动生化分析仪  北京生化分析仪器厂病理切片机、高倍显微(旧本0lympus公司)。

　　1.4数理统计方法计量资料用(x：l：s)表示，比较给药组和对照组间的差别用t检验其显著性，计数资料用X。检验对照组与给药组之间的差别。P<o.05表示该剂量药物与对照组比较有显著意义；P<0.01则表示该剂量药物与对照组比较有非常显著意义。

　　2方法

　　2.1对小鼠CCl4急性肝损伤模型的保护作用  取小鼠60只，雌雄各半，体重20士2g，随机分为6组：①空白对照组、②模型对照组、③五味子生品水煎液组、④五味子酒制水煎液组、⑤五味子醋制水煎液组、⑥联苯双酷阳性对照组(200mg／k曲，每组10只。五味子水煎液组每日灌胃给药1次，每次给药0.1mL，连续给药10天，空白对照组及模型对照组给予等量梭甲基纤维素钠。末次给药后 lhr，除空白对照组给橄榄油外，其余5组均腹腔注射0.1％ CCl4橄榄油溶液10mlMkg造成急性肝损伤。24hr后摘除一侧眼球取血，分离血清测丙氨酸氨基转换酶(ALT)及天门冬氨酸氨基转换酶(AST)活力。断头处死小鼠，取肝左叶同一部位组织，10％甲醛固定，按常规方法制备切片，光镜下病理检查。

　　2.2对小鼠对乙酞氨基酚(APAPl急性肝损伤模型的保护作用  实验动物及分组情况同2.1，末次给药后lhr，除空白对照组外，其余5组均腹腔注射对乙酞氨基酚(APAP)200mg／kg造成急性肝损伤。24hr后摘除一侧眼球取血，分离血清测ALT及AST活力。断头处死小鼠，取肝左叶同一部位组织，10％甲醛固定，按常规方法制备切片，光镜下病理检查。

　　2.3对小鼠D-氨基半乳糖(D-Gal)急性肝损伤模型的保护作用  实验动物及分组方法同2.1，末次给药后lhr，除空白对照组外，其余5组均腹腔注射D-Gal650mg／kg造成急性肝损伤。24hr后摘除一侧眼球取血，分离血清测ALT及AST活力。断头处死小鼠，取肝左叶同一部位组织，1090甲醛固定，按常规方法制备切片，光镜下病理检查。

　　3结果

　　3.1五味子及其炮制品对小鼠CCl4急性肝损伤模型的保护作用模型对照组与空白对照组比较，血清ALT及AST均明显增高，五昧子及其炮制品组均可明显降低CCl4急性肝损伤小鼠血清ALT及AST活力，与模型对照组比较差异有显著性，醋制五味子组的作用与联苯双酷组相当。表明五味子及其炮制品对小鼠CCl4急性肝损伤模型具有明显保护作用，其中醋制五味子组效果显著。

　　3.2五味子及其炮制品对小鼠对乙酞氨基酚(APAP)急性肝损伤模型的保护作用模型对照组与空白对照组比较。血清ALT及AST均明显增高，五味子及其炮制品组组均可明显降低对乙酞氨基酚(APAP)急性肝损伤小鼠血清ALT及AST活力，与模型对照组比较差异显著，醋制五味子组的作用与联苯双酷组接近。肝脏病理检查表明，空白对照组10只小鼠肝结构均正常，未见任何病理改变；模型对照组9／10只小鼠均可见肝细胞以中央静脉为中心的圆盘状坏死，但脂肪变性不明显。五味子生品组、酒制组、醋制组及联苯双醋组肝细胞发生坏死的动物数分别为6／10，5／10，2／10，4／10，其坏死程度比模型对照组明显减轻。表明五味子及其炮制品对小鼠对乙酞氨基酚(APAP)急性肝损伤模型具有明显保护作用。

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