广防己的药用标准虽然已被取消,但其中所含主要毒性成分马兜铃酸的解毒一直是许多专家致力于解决的问题。为了研究滋阴补肾丸对广防己的减毒作用及机理,我们设计了以下实验。
1实验材料
1.1仪器
日立L6000型高效液相色谱系统,包括L-4200H UV-VIS Detector D-2500型色谱数据处理仪。MA240D电子分析天平,上海第二天平仪厂。GQ70E-5型红外快速干燥箱,上海市吴淞五金厂。数显恒温水浴锅,金坛市大地自动化仪器厂。
1.2药物
广防己,为马兜铃科植物广防己Aristolochi fangchi Y.的干燥根,购自中国药品生物制品检定所,批号919-9001。滋阴补肾丸(浓缩丸),甘肃省河西制药有限公司生产,批号060601。
1.3试剂
马兜铃酸A对照品(aristolochic acid A,以下简称AA-I):
由中国药品生物制品检定所提供,批号110746-200406。甲醇、乙腈为色谱纯,山东省禹王实业总公司禹王化工厂产品;无水乙醇、冰醋酸为分析醇,购于安徽医药公司。水为纯化水。
1.4色谱条件
色谱柱:依利特Hypersil 0DS25(4.6 mmX 250 IIllTl),柱号为E:1417177;流速:1 mL/min;柱温:室温;检测波长:250 nm;进样量:10μL;流动相:乙腈一(水+冰醋酸)=48:52,其中,水一冰醋酸=62.5:1。理论塔板数不低于2 000。2方法与结果2.1标准溶液的制备
称取AA-I对照品7 mg,置于50 mIJ量瓶中,加无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得浓度为0.14 mg/mL的对照品储备液。精密量取对照品储备液2.O mL于10 IIlL量瓶中,用无水乙醇定容至刻度,摇匀,即得浓度为0.028 mg/mL的AA-I对照品溶液。
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