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  • 丹参最佳采收期初讨

  • 来源:现代中药 作者:姜卫卫 时间:2008-03-21 13:56:05
  • 核心提示: 丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎,全国大部分地区均有种植,味苦性温,具有祛瘀止痛,活血通经,清心除烦之功效。目前市售丹参多为人工种植,丹参的化学成分主要分为水溶性成分和脂溶性成分两大

        丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎,全国大部分地区均有种植,味苦性温,具有祛瘀止痛,活血通经,清心除烦之功效。目前市售丹参多为人工种植,丹参的化学成分主要分为水溶性成分和脂溶性成分两大类。脂溶性成分以丹参酮类为主,其中丹参酮ⅡA的含量较高;水溶性成分以丹酚酸类为主,以丹酚酸B的含量最高,2005版药典首次将其与丹参酮ⅡA共同作为质量鉴定的指标。本文除了考察这两种成分之外,还将丹参素和隐丹参酮作为考察对象,对不同采收期的丹参药材产量及其四种主要活性成分的影响进行了研究,旨在确定丹参药材的最佳采收期。   

    1材料、仪器与试剂

    11材料

        采挖于日照市援康生态农业有限公司丹参GAP基地,经山东中医药大学周凤琴教授鉴定,为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的根及根为分析醇。

     2方法   

    丹参酮A、丹酚酸B、丹参素、隐丹参酮含量

    的平均值作为一个采收期数据进行统计分析。  22丹参酮ⅡA、丹酚酸B、丹参素隐丹参酮含量测定   

      222对照品溶液的制备

        精密称量丹参酮ⅡA对照品适量,加甲醇制成每0016 mg·mL的对照溶液。

        精密称量丹酚酸B对照品适量,加75%甲醇制成0140 mg·mL的对照溶液。

        精密称量丹参素钠对照品适量,加1%醋酸溶液制成0044 mg·mL的对照品溶液。

        精密称量隐丹参酮对照品适量,加95%乙醇制成0078 mg·mL的对照品溶液。

    223方法学考察线性关系:制备4种待测成分的对照品溶液,精密吸取6个不同浓度分别进样,每次进样20ul,记录色谱图,绘制工作曲线。以标准品的实际进样量为横坐标(x),以峰面积为纵坐标(y),进行线性回归,计算结果如表2

      稳定性考察:提取四份不同采收期样品的丹参酮ⅡA、丹酚酸B、丹参素、隐丹参酮四种成分,分别在6241632 h内进样6次,RSD值分别为272%、280%、235%、260%,表明四种成分在考察时间内稳定。

        加样回收率考察:取已知含量的414采收样品,平行6份,分别精密加入丹参酮ⅡA、丹酚酸B、丹参素、隐丹参酮四种对照品适量,按照回收率%=[(测得总量一药材中含量)/加入量]×100%,计算加样回收率分别为9986%、9642%、9298%、10167%。

        重复性考察:分别精密称取样品6份,按供试品溶液制备方法制备,测定峰面积,计算丹参酮ⅡA、丹酚酸B、丹参素、隐丹参酮四种成分含量,计算RSD值分别为252%、135%、159%、11l%,表明四者重复性良好。

        精密度考察:取对照品溶液,按以上色谱条件,重复进样6次,测定峰面积,计算丹参酮ⅡA、丹酚酸B、丹参素、隐丹参酮四种成分RSD值分别为189%、O58%、385%、103%,表明四者精密度良好。

    23供试品溶液制备方法的选择

    231丹参酮ⅡA和丹酚酸B提取方法按2005版《中国药典》…方法提取。

    232丹参素和隐丹参酮提取方法的确定本实验分别设定不同提取方法、提取时间、提取溶剂、提取次数来考察丹参素和隐丹参酮的提取工艺,结果表明丹参素采用索氏水提5 h最佳,隐丹参酮采用超声95%乙醇提1h最佳,两者提取时样品均为02 g

    24丹参酮ⅡA、丹酚酸B、丹参素、隐丹参酮含量测定

        23中的提取方法提取丹参根中四种成分,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液20ul采用高效液相色谱法测定,参照上述色谱条件测定峰面积,以外标一点法计算含量。

    3结果与分析

    31丹参各项外观性状指标

        通过称量的方法,分别测量了丹参根、茎、叶的千重并做出变化趋势图。

     

        结果表明,地上部分(茎、叶)干重的变化趋势保持一致但与地下部分根的干重变化趋势不同,最为明显的是在911,此时茎为2405 g(最大值为10263357 g),叶干重达到最高值为3341g,而此时根干重则处在一个相对较低的值,仅为1267 g。从图l也可以看出药材产量主要形成于月到10月之间,药材最大于重出现在1011右,干重达到5163 g

    32不同移栽时间丹参中四种活性成分含量分村HPLC法测定四种成分含量,作曲线图。

    结果表明,丹参酮ⅡA丹参素和隐丹参酮三者含量曲线的变化趋势总体上趋于一致,含量最高峰出现在911,而丹酚酸B最高值则出现在414。四者最高百分含量分别为O75%、814%、245%、032%,以20株药材中活性成分总生物量为考察指标,最高含量都出现在1011,分别为2·043921696115 g

    4结论与分析

        由丹参植株地上和地下部分干重变化趋势可以看出:丹参植株代谢,先主要进行地上部分的生物量积累,于911左右开始转化为地下部分生物量的积累,地上部分生物量的积累是地下部分生物量积累的基础。911以后,丹参植株光合作用所产生的有机物不再向茎中运输而主要运向根部,使得茎的干重在911之后处于一个较平稳的状态,而根干重增加迅速,叶干重的减少一般认为是植株衰老自然凋落导致。

        4种活性成分的变化趋势中,一个显著特征为,此四种成分在911处于最高或者接近最高值,而丹参药材生物产量的最高值却是1011.因此在决定药材的最佳收获时期时,应以20株药材中四种活性成分总生物量为指标。同时也发现在414采挖的丹参其各项成分指标值也相对较高,特别是丹参酸B其含量为814%比911734%还要稍高,但其它三种则都是在911最高,所以传统认为丹参可以在春季采挖的方法并不科学,丹参根在经过一个冬季的代谢,其体内的物质必定有所消耗,活性成分含量必定有所下降,丹参最佳采收期还应定为10月中、下旬为最佳。

     

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