蝉花对免疫功能影响的实验研究

  蝉花为麦角菌科真菌大蝉草Cordyceps cicadae shing寄生在蝉科昆虫山蝉Cicda flammata Dist若虫上的子座及若虫尸体的复合体。味甘性寒，具有疏散风热、定惊镇痉、明目透疹、滋补强壮之功效。现代研究表明其有抗肿瘤作用。本文对蝉花进行了免疫功能实验和急性毒理试验。现报告如下。

l材料

1．1动物ICR小鼠，体重均为(20±2)g，♂♀各半，由浙江中医药大学实验动物中心提供，动物饲养合格证号SYXK(浙)2003一O003号。实验室温度(24±2)℃，相对湿度(65±5)％，饲以常规饲料，自由饮水。

1．2药品及试剂蝉花提取液：蝉花(采自杭州灵隐地区，经浙江省药检所鉴定，为Cordycepscicadaee．属正品)打粗粉，水煎取汁过滤浓缩制成浸膏，1g相当于生药3．988，实验时用蒸馏水配成所需浓度药液。双宝素口服液：安徽省黄山市徽州制药厂产品，批号030910。环磷酰胺：上海华联制药有限公司，批号031119。丙酮：杭州双林化工试剂厂，批号20030620。甲醇：上海振兴化工一厂，批号200406002。鸡红

细胞悬液：浙江中医药大学实验动物中心。

1．3仪器HWS一270恒温恒湿箱；AB204一N电子分析天平；722型可见分光光度计；Nikoa E-600显微镜。

2方法

2．1对鸡红细胞致小鼠溶血素抗体形成的影响

    取小鼠40只，按性别随机分成4组，每组♀♂各5只，分笼饲养，每鼠先ip5％生理盐水鸡红细胞混悬液0．2mi进行免疫，空白组ig等容量蒸馏水，蝉花大、小剂量组蝉花药液(1．8，3．6g／kg)，阳性对照组ig双宝素(8．8g/kg)，每天1次，连续7天。末次给药后2小时，摘眼球取血，离心，取血清用生理盐水稀释100倍，取稀释血清lml，与5％鸡红细胞悬液0．5ml、10％补体0．5ml混合，在37℃恒温箱中保温30分钟后，0℃冰箱中中止反应，离心，取上清液于540mm处比色，以光密度(OD)读数作为判定血清溶血素的指标比较各组的蒡异。

2．2对抗体积数的影

    取小鼠40只，按性别分成4组，分组及给药同2．1。每日1次，连续5天，给药第l天同时腹腔注射鸡红细胞(CRBC)，第6天眼眶取血，分离血清，用生理盐水倍比稀释，将不同稀释浓度的血清分别置于微量凝集板内，再加入红细胞悬液，37'E孵化3小时，观察凝集程度，计算抗体积数。

2．3对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

    取小鼠40只，分组给药同2．1。末次给药后2小时，每鼠腹腔注射5％鸡红细胞悬液0．4ml，6小时后将小鼠脱颈处死，腹腔注射生理盐水2ml，轻柔腹部后，剪开腹腔皮肤，吸取腹腔液，分滴于两片载玻片上，于37℃孵箱中温育30分钟后。用生理盐水漂洗、吹干，丙酮、甲醇溶液(1：1)固定5分钟，4％Giemsa—Wright染液、晾干，油镜观察。每片计100个巨噬细胞，计算吞噬百分数和吞噬指数。

2．4急性毒理试验

    取小鼠先禁食12小时(不禁水)后，开始实验，给小鼠灌胃100％浓度药液0．4ml／10g，每5小时1次，连续2次，剂量为80g，kg，给药后自由饮食，每天上、下午各观察1次，连续l周。

2．5数据统计

    组间比较采用方差分析。所有数据均以x±s表示，经F'mhe~计软件进行数据的统计分析，P<0．05时为有显著性差异。

3结果

3．1蝉花对小鼠免疫功能的影响见表1。

3．2蝉花对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响  见表2。

3．3急性毒理试验  7天观察结果表明。每天食量及体重基本接近，所有小鼠于给药10分钟后出现轻度镇静、少动、活动减少，24小时后全部恢复正常。其余方面未见异常．以后连续观察至第7天，神经、胃肠、泌尿生殖系统，皮毛，眼等方面均未见异常现象。急性毒理试验表明蝉花最大耐药量为80g/kg，相当于人临床用量444倍。

4讨论

金蝉花滋补强壮，能补助人体正气。扶正祛邪。本实验表明蝉花可显著提高血清溶血素水平，显著提高巨噬细胞的吞噬活性，提示其具有促进免疫功能作用，为今后研究开发蝉花提供了一定的依据。据文献记载。有服用另一品种“小蝉花”(即麦角菌科虫草属真菌小蝉草寄生于蝉科昆虫蟪蛄 platyplure Kaempferi Fabr.幼虫的体内所抽出的子座及寄生幼虫尸体的干燥复合体)引起呕吐多起，故对蝉花进行了急性毒性试验。实验证明蝉花最大耐药量为80g/kg，相当于人用临床量444倍，安全无毒。

 

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