百草妇炎清栓的质量标准研究

余家奇 ，石尚友 ，刘 莉 (1．贵州省遵义医院，贵州遵义 563000； 2．贵州省遵义市药品检验所 563000) 百草妇炎清栓由苦参、百部、蛇床子、仙鹤草等组成，具有清热解毒、杀虫止痒、祛瘀收敛的功效。用于霉菌性、细菌性、滴虫性阴道炎和宫颈糜烂等症。为了控制药品质量，对百草妇炎清栓中的主要成分(苦参、百部、蛇床子)进行了薄层鉴别及苦参碱含量测定。 1 器材 1．1 仪器TU-1800PC紫外分光光度计(北京普析通用科学仪器公司)；高效液相色谱仪(P-200Ⅱ型高压恒流泵，UV-200Ⅱ可变波长紫外检测器，大连依利特科学仪器公司)；EASY 3 000色谱工作站(浙江大学)；色谱柱(Diamonsil C18 ODS 200 mm×4．6mm，迪马公司)；AUW—120D电子分析天平(日本岛津株式会社)；pHs-2C酸度计(上海雷磁科学仪器公司)；吸附硅胶C为青岛海洋化工厂出品。 1．2 试药与试剂百仙妇炎清栓(自制)；苦参碱(中国药品生物制品检定所)；甲醇(分析纯，山东禹王化学试剂公司)，磷酸(分析纯，贵阳磷山化工厂)；三乙胺(分析纯，重庆川江化学试剂公司)。 2方法与结果 2．1 处方与制法由苦参、百部、蛇床子、仙鹤草、紫珠叶、白矾、冰片、樟脑、硼酸甘油组成，经过捡选，去掉杂质及非药用部位，按照处方称取以上9味药材，将苦参、百部、蛇床子、仙鹤草、紫珠叶加水煎煮3次，第l，2次各2 h，第3次l h，合并煎液，趁热滤过，滤液浓缩至相对密度为1．08—1．10(25℃)的清膏，加95％乙醇使含醇量达60％，静置24 h，取上清液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1．30一1．35(25℃)的稠膏，备用。另取甘油，加热至115—120℃。加人明胶(预先用适量水浸渍l h)，不断搅拌至明胶溶化，将白矾，硼酸粉成最细粉，加入甘油明胶基质中，再加入稠膏搅拌后，停止加热：用少量乙醇溶解冰片、樟脑，当基质温度降至90℃时，加入搅匀，浇模，即得。本品为棕黄色至棕褐色的栓剂。 2．2 薄层鉴别 2．2．1 苦参的鉴別取重量差异项下的本品，置水浴上融化，充分混匀，放冷，取4 g，置蒸发皿中，加水3 ml，水浴充分融化后，加入0．3 ml浓氨试液，混匀，按等量递加原则，加入硅藻土10 g，使样品充分分散，挥干，期间不断搅拌，将样品转移250 ml具塞锥形瓶中，并用70 ml氯仿分次洗涤蒸发皿，超声处理30 min，放置过夜，再超声处理l h，滤过，残渣用25 ml氯仿，分次洗涤，合并滤液及洗涤液，挥干，残渣用5 ml无水乙醇溶解，作为供试品溶液。再取苦参对照药材0．3 g，加氯仿20 mI，浓氨试液0．2 ml，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇l ml使溶解，作为对照药材溶液。再取苦参碱对照品，加乙醇制成每毫升含0．5 mg的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法实验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯．丙酮一醋酸乙酯．浓氨试液(2：3：4：0．2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点。 2．2．2 蛇床子的鉴別取苦参鉴别项下供试品溶液作为供试品溶液。另取蛇床子对照药材1 g，加氨水1mI及氯仿15 ml，超声15 min，滤过，滤液浓缩至干，残渣加无水乙醇1 ml溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法实验，吸取上述两种溶液各10μ1，分别点于同一硅胶C薄层板上，以苯一醋酸乙酯．甲醇一异丙醇一浓氨试液(12：6：3：3：1)为展开剂，置氨蒸气饱和的层析缸中展开，取出，晾干，置紫外灯(365 nm)下检视。供视品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 2。2．3 百部的鉴别取重点差异项下的本品6粒，置水浴上融化，充分混匀，加入硅藻土20 g，使样品充分分散，挥干，期间不断搅拌，加90％乙醇100 ml及1％盐酸5 ml，水浴回流提取30 min，滤过，滤液静置过夜，加氨水调pH lo，用等体积氯仿萃取3次，合并氯仿液，挥干，加90％乙醇1 ml溶解作为供试品溶液。另取百部对照药材6 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法实验，吸取上述两种溶液各5μI，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿一甲醇一甲酸(8：2：O．7)为展开剂，展开，取出，晾干，喷碘一碘化钾试液显色。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 2．3 含量测定 2．3．丑 色谱条件与系统适用性实验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；磷酸缓冲溶液(O．2％三乙胺水溶液]000 ml，用磷酸凋pH 3．5)一乙腈(96：4)为流动相；检测波长为207 nm。理论板数按苦参碱峰计算应不低于4 500。 2．3．2 对照品溶液的制备取苦参碱对照品适量，加甲碱制成每1 ml含苦参碱0．013 mg的溶液，即得。 2．3．3 供试品溶液的制备取重量差异项下的本品，置水浴上融化，充分混匀，放冷，取10 g，精密称定，置蒸发皿中，加水3 ml，水浴充分融化后，加入0．3 m1浓氨试液，混匀，按等量递加原则，依次加入硅藻土10 g，使样品充分分散，挥干，期间不断搅拌，将样品转移至250 ml具塞锥形瓶中，并用70 ml氯仿分次洗涤蒸发皿，超声处理30 min，放置过夜，再超声处理1 h，滤过，残渣用25 ml氯仿，分次洗涤，合并滤液及洗涤液，挥干，残渣用甲醇溶解，并转移至10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取1 ml，置10 Id量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 2．3．4 测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10txl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。本品每粒含苦参以苦参碱(C15H24N2O)计，不得低于O．35 mg。 3 讨论 3．1 本次实验曾用采用氯仿及石油醚(60—90℃)提取样品，参考《中国质量控制技术》仙鹤草TLC条件，在硅胶G薄层板上采用正已烷．醋酸乙酯．冰醋酸(20：25：0．7)、甲苯．醋酸乙脂(9：])、甲苯．醋酸乙脂(7：3)、氯仿．甲脂(8：2)等展开条件鉴别仙鹤草，但均未成功。 3．2 本次实验曾采用氯仿、醋酸乙酯、乙醇及甲醇等溶剂提取样品，参考《贵州省中药材、民族药材质量标准》紫珠叶化学成分主要为黄酮类化合物，在硅胶c薄层板上采用苯．甲醇．醋酸(35：10：5)、正已烷一醋酸乙脂．冰醋酸(20：25：0．7)等展开条件及在聚酰胺薄膜上采用36％醋酸溶液展开鉴别紫珠叶，但均未成功。 3．3 本次实验曾采用乙醚、石油醚、氯仿及甲醇等溶剂提取样品，参考《中国药典》，在硅胶C薄层板上展开鉴别冰片及樟脑，也未成功，冰片及樟脑未被检出。 3．4 薄层鉴别结果表明，本法较为简便，斑点清晰，重现性好，专属性强；含量测定表明苦参碱在0．16—1．6μg范围内呈良好线性关系。在4 h以内重复测定含量稳定。

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