养心调肝益肾煎剂对去势雄鼠性活动及阴茎一氧化氮含量的影响

黄学宽，任凌燕，李 进，代兴碧，韩志刚，沈 清，刘 洋 (重庆医科大学中医药学院，重庆400050) 性功能障碍是男性尤其是老年男性的常见病、多发病。而一氧化氮(nitric oxide，NO)是一种具有双重作用的体内局部调节因子，由L一精氨酸在一氧化氮合酶(NOS)的作用下生成，其在雄性生殖系统中分布广泛，它能够调节睾丸的血液供应、激素的分泌和雄性的生殖能力。本实验着重探讨养心调肝益肾煎剂对去势雄鼠性活动和阴茎海绵体内皮细胞NO含量的影响，从而初步揭示养心调肝益肾煎剂和调节“心一肝一肾”生殖轴在治疗男性尤其是老年男性性功能障碍过程中的作用机理。 1材料与方法 1．1 药品与试剂乙醚；0．9％生理盐水(NS)；男宝胶囊(Nan—ba0)，规格0．3旷粒，国药准字Z22022395，产品批号030901，吉林省通化天立药业有限公司生产，是临床常用的补肾壮阳中成药，实验前按男宝0．3g加3．5ml蒸馏水的比例配成男宝混悬液(Nanbaomixed liquid)供灌胃使用；养心调肝益肾煎剂(YXTGYS，暂命名为活力神)，由柴胡、白芍、酸枣仁、柏子仁、仙灵脾、鹿茸等组成，按常规法自制煎剂(即冷水浸30 min，沸后煎30 min，煎3次，合并药液，并浓缩为每毫升煎剂含生药3．4 g)。NO测试盒则购自南京建成生物工程研究所。 1．2 动物清洁级Wistar大鼠，其中雄鼠40只，体重(200± 20)g；雌鼠40只，体重(200±20)g。由重庆医科大学实验动物中心提供。 1．3 主要器材大鼠灌胃器；手术器械；Dys9—1型电动玻璃匀浆机，宁波新芝科器研究所；JA200型电子天平(1／100)，上海精天电子仪器有限公司；Biofuge fresco低温离心机，德国Herraces公司；752紫外光栅分光光度仪，上海精密仪器公司等。 1．4造模和分组 1．4．1 造模取雄鼠32只，乙醚麻醉后，下腹正中小切口，将睾丸拉出且连同附睾一并剪除，缝合创口，另一侧睾丸作同样处理。但应注意，雄鼠用乙醚麻醉不宜过深，皮肤切口不宜过长，而且消毒要严格，否则易感染；术后每笼1只，过多会互咬，造成脱线或感染(真)。 1．4．2 分组术后第8天，将去势雄鼠随机分为对照组、男宝组、养心调肝益肾煎剂l组、养心调肝益肾煎剂2组，每组8只；另取同批未去势的正常雄鼠8只为正常对照组。 1．5 实验方法正常对照组、去势对照组每只给予生理盐水3 ml／次，1次／d，灌喂；去势男宝组每只给予男宝混悬液1．5 ml／次，1次／d，灌喂；去势养心调肝益肾煎剂1组、2组每只分别给予养心调肝益肾煎剂1．5ml／次、3ml／次，1次／d，灌喂，连续21d。末次给药后的第21天晚上，将去势雄鼠和正常雄鼠放人透明观察箱中，并与同批饲养的雌鼠1：I配对，在晚间灯光阴影处观察!h内每只雄鼠对雌鼠的嗅舔、爬背次数并作记录。次日处死去势雄鼠和正常雄鼠，分离阴茎，电子天平称重，电动玻璃匀浆机匀浆2 min，用0．9％的生理盐水制成10％的匀浆液，低温离心机16 000 r／min离心，取上清液，按NO测试盒的说明方法检测阴茎海绵体内皮细胞NO的含量。 1．6 统计方法所有数据以均数：真：标准差(x±s)表示，应用SPSSl0．0统计软件分析系统，多组比较采用方差分析并作组间两两比较，以P

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