中药合欢花抗抑郁活性部位的初步筛选研究

李作平，张嫚丽，毛知娟，范桂敏 (河北医科大学药学院，河北石家庄 050017) 合欢花是常用中药，为豆科植物合欢Albizzia扣brissin Durazz的干燥花序，性平味苦，具有解郁安神之功效，常用于治疗心神不安、忧郁失眠等症。合欢花具有与合欢皮类似的安神作用，但理气解郁作用优于合欢皮，一些常用的解郁方剂如解郁合欢汤、蒺藜合欢饮等均以合欢花为主药。合欢花水煎液药理实验表明其具有较强的镇静催眠作用，并在同剂量下其作用强于酸枣仁。合欢花水提物在小鼠强迫游泳实验和小鼠悬尾挂实验中，与地西帕明类似均能明显地对抗两种行为绝望模型小鼠的绝望行为，使不动时间缩短。其中合欢花中剂量组(6g．kg-1)抗抑郁的效果较其他剂量组显著，具有明显的抗抑郁作用。为进一步筛选合欢花的抗抑郁作用的活性部位，本实验对合欢花水提物、醇提物以及它们的石油醚、乙醚、醋酸乙酯和正丁醇各萃取部位采用小鼠强迫游泳的抗抑郁动物模型，进行了抗抑郁活性部位的初步筛选。 1 材料与药品 1．1 动物雄性昆明种小鼠(二级)，体重20—24 g，由河北医科大学实验动物中心提供(动物合格证为冀医管字04063)，本室饲养3 d后使用，室温20一23℃，自由饮水和取食，实验均在8：00-12：00进行，每只动物只用1次。 1．2 药品合欢花购自石家庄市乐仁堂药店(产地河北)，安拿芬尼(Anafranil盐酸氯帕明，25 mg/片产品批号03006，北京诺华制药有限公司)，95％乙醇为医用，石油醚、乙醚、醋酸乙酯、正丁醇等试剂均为分析纯。 2 方法 2．1 受试样品的制备 2．1．1 合欢花水提物及其各萃取部位的制备取合欢花(粉碎)60 g，水煎煮3次，1 l／次，趁热过滤，合并滤液，减压浓缩至200m1。将浓缩液平均分为两份，1份作为合欢花水提物供药理实验用；另l份依次用石油醚、乙醚、醋酸乙酯、正丁醇进行萃取，所得各萃取液减压浓缩至干并挥至无醇味，各加水100 mI，得合欢花水提物的石油醚萃取物、乙醚萃取物、醋酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和剩余水溶物的药液，各提取物的浓度均为0．3 g．ml-1(生药／水)，备用。 2．1．2 合欢花醇提物及其各萃取部位的制备取合欢花(粉碎)60 g，用95％乙醇回流提取3次，l h／次，趁热过滤，合并滤液，减压浓缩至干，加水稀释至200 ml。以下操作同合欢花水提物及其各萃取部位的制备，浓度均为0．3 g．ml-1生药／水)，备用。 2．1．3 石油醚和醋酸乙酯提取物配伍药液的制备取合欢花(粉碎)54 g,95％乙醇回流提取3次，1 h／次，趁热过滤，合并滤液，减压浓缩至干，加水180 ml。将此水液平均分为3份：l份作为95％乙醇提取物供药理实验用；另1份依次用石油醚、乙醚、醋酸乙酯进行萃取，所得各萃取液减压浓缩至干，各加水稀释至60 Id，得合欢花的石油醚萃取物、醋酸乙酯萃取物、乙醚萃取物；第3份依次用石油醚、乙醚、醋酸乙酯萃取，将石油醚和醋酸乙酯萃取液合并后减压浓缩至干，加水至60 ml，得合欢花醇提物的石油醚和醋酸乙酯配伍药液，浓度均为O．3 g．ml-1生药／水)，备用。 2．2 安拿芬尼阳性对照药液的制备阳性对照药安拿芬尼给药剂量为30 mg．kg-1取1片安拿芬尼加水16．7 ml制成均匀的混悬液即得。 2．3 小鼠强迫游泳实验小鼠本室饲养3 d后，连续给药5 d。末次给药l h后，测定强迫游泳的小鼠不动时间。参照Porsoh等的方法，水缸高20 cm，直径14 cm，水深lO cm，水温25℃，将小鼠放入水中6 min，记录后4 min内累计不动时间。所谓不动是指小鼠在水中停止挣扎，或动物呈漂浮状态，仅有细小的肢体运动以保持头部浮在水面。选择游泳的不动时间为60—170s的实验数据进行统计学处理。 给药剂量安拿芬尼为O．03 g．kg-1，其它供试药物剂量为6 g．kg-1。 3 结果 3．1 合欢花水提物及其各萃取部位对小鼠强迫游泳实验的影响将小鼠随机分8组，每组14只，阳性对照组和阴性对照组分别口服灌胃安拿芬尼和蒸馏水，给药组灌胃合欢花水提物、石油醚萃取物、乙醚萃取物、醋酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和剩余水溶物药液，实验结果表明，合欢花水提物的石油醚和醋酸乙酯萃取部位与对照药安拿芬尼类似，均能显著缩短小鼠游泳的不动时间(P<0．01)，表明它们具有抗抑郁活性，而其它各萃取部位经统计学处理无显著性。结果见表1。 3．2 合欢花乙醇提取物及其各萃取部位对小鼠强迫游泳实验的影响实验方法同上，结果表明，合欢花醇提物及其提取物的石油醚和醋酸乙酯萃取部位与阳性对照类似，均能明显缩短小鼠游泳的不动时间(P<0．01)，表明它们具有显著的抗抑郁药理活性，而其它各萃取部位没有显著性。结果见表2。 3．3 合欢花的石油醚和醋酸乙酯萃取部位配伍对小鼠强迫游泳实验的影响实验方法同上，结果表明合欢花醇提物中石油醚萃取物和醋酸乙酯萃取物合并液相对缩短了小鼠游泳的不动时间(P<0．01)，显示了一定的抗抑郁活性，但与其它显效样品相比无显著性差异，说明石油醚、醋酸乙酯配伍后无明显协同作用。结果见表3。 4 讨论 强迫游泳实验是经典的抗抑郁剂评价模型，常用于抗抑郁药的初筛，采用本模型筛选合欢花抗抑郁作用的活性部位，实验结果表明：合欢花水提物和醇提物均能明显缩短小鼠游泳的不动时间；合欢花水提物和醇提物的石油醚和醋酸乙酯萃取部位均表现与阳性对照药物安拿芬尼类似(P

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