高效液相色谱法测定金胆片中虎杖苷含量

柯长青 ，蒋永海 (1．浙江亚东制药有限公司，浙江诸暨 311800； 2．浙江省绍兴市药品检验所，浙江绍兴 312000) 金胆片由龙胆、金钱草、虎杖、猪胆膏等多味中药组成，具有利 胆消炎的作用，方中虎杖含有的虎杖苷(又名白藜芦醇苷)具有保 肝作用和抗菌作用。为控制本制剂的质量，笔者采用高效液相色谱 法(HPLC法)测定了金胆片中虎杖苷的含量，现报道如下。 1仪器与试药 Agilent 1100型高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司)， 包括Agilent 1100系列四元梯度泵，Agilent 1100自动进样器，Agilcnt 110 0系列VWD检测器，Agilent 1100原装工作站；十万分之一电子 分析析天平(瑞士梅特勒公司)。虎杖苷对照品(中国药品生物制品检 定所，批号为200310)；乙腈为色谱纯；水为重蒸馏水；金胆片(江苏 扬子江药业集团有限公司)。 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱：Shim—pack CLC—ODS柱(150 mm x6．o mm，5 μm)： 流动相：乙腈一水(18：82)；流速：1．0mL／min；柱温：30℃；检测波 长：303 nm。 2．2 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥24 h的虎杖苷对照品11．26 mg， 置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取l mL． 置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(C对=18．02 μg／mL)。 2．3 方法学考察 阴性干扰试验：按处方比例及王艺制备阴性空白样品，按样品 含量测定项下方法操作．结果表明，处方中其他药味对测定无干 扰，见图l． 线性关系考察：分别精密吸取虎杖苷对照品溶液2．0，4．O， 8．0，12．O，16．0，20．O μL进样测定，以虎杖苷峰面积积分值(r)为 纵坐标、进样量(X)为横坐标进行线性回归，得回归方程为：y= 7．160 6X+0．555 l，r：o．999 9。结果表明虎杖苷进样量线性范围 是36．04-360．40μg。 精密度试验：精密吸取同一对照品溶液10 IxL，重复进样6次， 测定对照品溶液峰面积。结果的RSD为0．4％(／l：6)，表明仪器精 密度良好。 稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液10 txL，分别于0，1，2， 4，8，24 h时进行测定，结果24 h内测定结果稳定，RSD为1．15％ (n=6)。 重现陸试验：取同批样品(批号为04040501)5份，按样品含量测 定项下方法测定。结果的RSD为0．78％，表明本方法重现性较好。 加样回收试验：精密称取已知含量的金胆片粉末0．1 g(样品 含量为1 238．4 μg／g)6份，精密加入虎杖苷对照品适量，照供试品 溶液的制备方法操作，测定虎杖苷含量。结果见表l。 2．4 样品含量测定 取本品10片，除去糖衣后，精密称定，研粉后称取约0．2 g，精 密称定，置25 mL量瓶中，加甲醇适量，超声处理30 min，取出，放 冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶 液。精密吸取供试品溶液10 IxL，按上述色谱条件测定。结果批号为 030526一l，030304—2，04040501的3批样品中虎杖苷含量分别为 453．6，417．5，380．0μg／片。 3 讨论 曾比较了多种比例的流动相，发现以乙腈一水(18：82)为优， 分离效果好，保留时间适当。关于虎杖中成分的定量分析，文献报 道多为测定其中大黄素的含量，因大黄素存在于多种药典收载的药 材中，如大黄、决明子、何首乌等，故其专属性差；同时文献报道 本制剂中虎杖含有的虎杖苷具有保肝和抗菌作用，具有明显的药 理活性。因此，采用HPLC法测定该制剂中虎杖苷的含量，既具有较 好的专属性，同时又体现了检测成分的有效性．

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