黑布药膏质量标准研究

李卫敏，车晓平，赵小伟 黑布药膏系医院制剂，由五倍子、蜈蚣等制成，外用具有破瘀软坚散结之功效，临床用于瘢痕疙瘩、疖痈初期、乳头状皮炎等。为了保证黑布药膏的质量和用药安全有效，笔者采用薄层色谱法对黑布药膏中的五倍子进行了定性鉴别，采用高效液相色谱法测定了没食子酸的含量，建立了较为完善的质量控制标准，结果准确、可靠，操作简便。 1 仪器与试药 高效液相色谱仪1100系列(Agilent公司)，7530分光光度计(上海分析仪器厂)，AEL-200电子天平(湘仪一岛津)． 没食子酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号081—9501)，黑布药膏(北京中医医院制剂室，批号分别为040520、040923、050309)。实验用水为蒸馏水，磷酸、甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯． 2方法与结果 2．1 薄层色谱鉴别 取黑布药膏2 g，加硅藻土4 g，充分分散后加乙醇30 mL，超声提取l0 min，过滤，滤液蒸干，残渣加乙醇1 mL使其溶解，作为供试品溶液。取无五倍子的阴性对照品2 g，同法制成阴性对照品溶液。取五倍子对照药材0．2 g，加乙醇lO mL，同法制成对照药材溶液。另取没食子酸对照品，加乙醇制成每1 mL含l mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[2000年《中国药典》(一部)附录VIB]试验，吸取上述溶液各5 μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸(5：5：1：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 2．2 含量测定 2．2．1 色谱条件 分析柱：ZORBAX SB-C18。柱(4．6 mix 150 nun，5μn)，流动相：水一甲醇一磷酸(95：5：0．05)，检测波长为270nm，柱温为25℃，流速为l mL／min。理论塔板数按没食子酸峰计算不少于8000。 2．2．2 对照品溶液的制备 取没食子酸对照品适量，精密称定，加水溶解，制成每1 mL含没食子酸o．287 mg的溶液作为对照品溶液。 2．2．3 供试品溶液的制备 精密称取黑布药膏约0．02 g，置锥形瓶中，精密加入100 1nL水，称定，沸水浴加热，使用回流装置提取3 h，冷却后精密称定，用水补足重量，玻璃漏斗过滤。精密吸取续滤液5 mL，用水定容至l0 mL容量瓶中，微孔滤膜(o．45 μm)过滤，作为供试品溶液。 2．2．4 线性关系 精密吸取没食子酸对照品溶液10 mL，用水定容至50 mL的容量瓶中，并精密吸取1．0、2．5、5．0、7．5、lo mL，分别定容于10 mL的容量瓶中，分别取20 pL注入高效液相色谱仪中测定，以没食子酸峰面积(Y)对进样量(X)进行线性回归。结果没食子酸在0．1—1．1 ug范围内线性关系良好，回归方程为：Y=2．965×103X-11．18305，r=O．99996(n=5)。 2．2．5 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液，重复进样5次，测定没食子酸的峰面积，结果平均峰面积为1 106．48225，RSD为O．91％。 2．2．6 重复性试验 取同一批号样品，制备6份供试品溶液，按拟定的含量测定方法，重复平行测定．没食子酸平均含量为168．73 mg／g，RSD为1．10％。 2．2．7 稳定性试验 按供试品溶液制备方法制备溶液，将溶液放置0、2、4、6、8、10、12、24 h后，分别测定没食子酸峰面积，RSD为0．36％，表明样品溶液在24 h内稳定． 2．2．8 回收率试验 精密称取已测知含量的黑布药膏样品(批号040923)适量，加入定量的没食子酸对照品，按2．2．3项下操作，制成加样供试品溶液。吸取加样供试品溶液20 μL注入高效液相色谱仪中，测定没食子酸的含量，分别计算回收率，结果没食子酸的平均回收率为96．71％，RSD为1．96％(n=6)。结果见表l。 2．2．9 样品的含量测定 取3批样品，按上述2．2．3项下操作，各制备3份供试品溶液，依法测定，结果见表2。 3 讨论 黑布药膏方中君药为五倍子，约占80％，其水解后的产物主要为没食子酸。黑布药膏样品经硅藻土分散后制备的供试品溶液，薄层色谱分布良好，以2％的三氯化铁溶液显色，斑点集中清晰，可作为黑布药膏的定性鉴别方法。 高效液相色谱法测定黑布药膏中没食子酸的含量，方法准确，灵敏，重复性好。我们对色谱条件进行了考察：流动相曾采用水一四氢呋喃一冰醋酸一甲醇(154：40：l：5)，色谱柱曾采用Hypersil C18柱(4．6 mmX250 mm，5 μM)，供试品中没食子酸峰均分离不理想，后选择了ZORBAX SB-CI8柱(4．6 mM×150 mm，5 μm)，流动相为水一甲醇一磷酸(95：5：0．05)，并对没食子酸对照品溶液及供试品溶液在265—275 nM处进行扫描，确定没食子酸最大吸收波长为270 nm，没食子酸峰分离完全，峰形良好，保留时间重现性好，从而确定了高效液相色谱法测定黑布药膏中没食子酸含量的最佳测定条件。

(如果您认为转载内容侵犯了您的权益，请及时联系我们，本网站将在收到信息核实后24小时内删除相关内容。)