牛黄复方制剂中化学成分的研究
1实验材料
1．1材料
黄连碎末，牡丹皮粉末，赤芍药粉末，大黄粉末，栀子粉末，含药血清，空白血清。
1．2供试液制备
黄连：称取黄连
牡丹皮：粉末
赤芍药：粉末0．
大黄：粉末0．
栀子：粉末lg，加75％乙醇lOmL，置温水浴中浸2h，滤过，用滤液做供试液。测栀子时取样品少许蒸干，加75％乙醇适量，用温水浴2h，滤过，滤液点样。
含药血清：除表明外，均用甲醇溶解处理。
空白血清：处理方法同含药血清。
2方法与结果
黄连：将复方样品液、黄连样品液与含药血清、空白血清处理后，点样于硅胶G薄层板上，以苯一乙酸乙酯一甲醇一异丙醇一水(6：3：1．5：1．5：O．3)为展开剂，置氨气饱和层析缸内，展开，置紫外灯下观察。阳性对照药材，复方供试液在相同位置有黄色荧光斑点，复方稍暗，但血清中无。
牡丹皮：将复方供试液少许与乙醚混匀后静置，萃取至醚层无色挥干乙醚，残渣加丙酮少量溶解，做供试液。动物血清以同法处理，点于硅胶G板上，以环己烷一乙酸乙酯(3：1)展开，酸性5％FeCk乙醇液显色。复方及阳性药材在相同位置有褐色斑点，而血清则在阳性与复方褐色斑点的上方有一蓝色光斑点。此外，将复方提取液的上清部分与阳性对照药材以环己烷一乙酸乙酯(3：1)展开，复方及阳性药材在相同位置仍有相同斑点。
赤芍药：将复方供试液、阳性药供试液、含药血清、空白血清点于硅胶G板上，以氯仿一乙酸乙酯一甲醇一甲酸(40：5：10：O．2)为展开剂，取出晾干，喷以5％香草醛一浓硫酸显色。结果：赤芍供试液显灰褐色斑点，复方供试液由上至下分别呈粉色斑点及淡褐色、粉色荧光，血清在阳性药材相近位置有淡灰色斑点，推测赤芍中含有的成份可能人血。
大黄：将大黄供试液、复方供试液点于硅胶G板上，以石油醚一乙酸乙酯一甲酸(15：5：1)展开，在紫外灯(365nm)下观察，在R0.81处有棕色斑点。将复方供试液、大黄供试液、血清乙醚提取液、空白血清点于同一薄层板上，展开，结果血清在与复方、大黄供试液相同R，处没有荧光斑点。
栀子：将栀子提取液与复方供试液点在硅胶G板上，结果在R0.24处有棕褐色荧光，说明复方供试液。中有栀子成分。将血清乙醚提取液同样点于薄层板上，在相同位置上也有很淡荧光，血清中可能有栀子成分。
通过对牛黄复方制剂、含药血清、空白血清及部分阳性药作对照和分析，结果如下：复方样品液、含药血清、阳性对照药、空白血清经TCL法，以药典上的展开剂展开，则只有赤芍药、栀子的阳性药及样品液、含药血清在薄层板上有相近的R，值。因此，推测这几种成分可能人血。在层析过程中，样品液除有与阳性药材相同R，的斑点外，仍有其他斑点。对于血清中没有黄连成分的现象，一般认为与小檗碱不易被吸收有关。但也有报道，人口服黄连素的药代动力学研究中，黄连素容易吸收且达到一定浓度，CMAx=394．7μg／L。小鼠口服黄连素容易吸收，狗口服不容易吸收的报道也有。本实验中TCL法中没有发现黄连素、蒽醌类，可能有以下原因：一是黄连素可能与没有被发现的其他成分如蒽醌类等发生了反应；二是可能由于种的问题小鼠体内吸收与人有差别，小鼠吸收可能没有或很少，TCL法没有检测到。此外以中药材作为阳性对照品有如下缺点：提取过程以药典规定的某一成分为指标，势必应起其他成分浸出的减少或无法提出，导致有些成分可能是有效成分在与复方浸提液或含药血清比较时，没有出现应有的斑点结果。
3讨论
牛黄复方制剂为黑龙江中医药大学附属医院院内制剂，临床上用于治疗风热喉痹(相当于西医学的急性咽炎)，效果显著。该制剂的主要成分包括：牛黄(人工)、黄连、黄芩、大黄、栀子、牡丹皮、赤芍药、郁金、冰片等，其功效为泻火解毒，清热化痰，活血止痛，消肿利咽，适用于邪热传里，肺胃热盛所致的风热喉痹。
为了研究全方治疗作用的物质基础，笔者将复方作为一个整体进行化学研究，与单味药化学成分、有效成分对照比较，观察复方中化学成分及变化。结果为赤芍药、栀子成分可能入血，血清中没有黄连成分，没有发现黄连素、蒽醌类。
通过本研究，确定牛黄复方制剂进入动物血清的成分，探讨牛黄复方制剂中有效部位(成分)，为新药研究做准备。为了使中医药走出国门，与国际接轨，应从药理的角度解释其作用，而化学成分的研究则是以药物作用的物质基础来阐明，挖掘中药方剂配伍的科学内涵，探索复方制剂中化学成分的变化规律，发现药效物质基础，从而达到优化处方、制定科学的制剂工艺，以提高制剂的水平。而以化学成分含量评价中药复方质量这一方法，仍值得进一步探讨研究。
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