防风提取工艺的研究
防风，为伞形科植物Saposhnikovia divaricata(Turcz．)Schischk．的干燥根，具有解表祛风、渗湿止痉的功能，临床用于感冒头痛，风湿痹痛，风疹瘙痒，破伤风等。主含挥发油、色原酮类、香豆素类、聚炔类、有机酸类及多糖类等成分。其中，升麻苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷等色原酮类成分具有明显的解热、镇痛、抗炎及抗血小板聚集作用，为其主要活性成分之一，中国药典2005年版(一部)，也以此两成分的含量作为评价防风质量的指标。笔者在考察含防风的制剂质量时发现，色原酮类成分在制剂中的转移率较低，究其原因，未见文献报道。为研究防风的制剂质量，笔者对防风的提取工艺进行了研究。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪(Shimadzu，Lc-
对照品：5—0--甲基维斯阿米醇苷，批号：1523—207203；升麻苷，批号：1522—203203，均购自中国药品生物制品检定所，供含量测定用。防风药材：购自毫州中药材公司，批号：20051222，经鉴定，为伞形科植物防风Saposshnikovia di varicata(Turcz．)Schischk．的干燥根。乙腈：色谱纯(默克公司产品)；其余试剂均为分析纯。
2 实验方法
2．1 色谱分析条件Lichrospher C18柱(4．6×
2．2供试品溶液和对照品溶液的制备供试品溶液的制备：精密量取提取液适量，以0．45цm的微孔滤膜滤过，即得。对照品溶液的制备：分别精密称取升麻苷对照品8．9mg和5-0-甲基维斯阿米醇苷7．8mg，置于25ml容置瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即为对照品储备液。精密吸取储备液 lml，置l0ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得对照品溶
液。
2．3 标准曲线的制备精密吸取上述对照品溶液2．0,4．0、6．0、8．0、10．0、12．0цl，注入液相色谱仪，记录色谱图和峰面积，以峰面积对进样量作图，计算线性方程及相关系数，分别为：升麻苷：Y=1591．5X+20649，相关系数r=0．9992；5—0－甲基维斯阿米醇苷：Y=2333．8X－986．13，相关系数r=0．9999。结果表明，升麻苷在0．0712～0．4272μg、5—0－甲基维斯阿米醇苷在0．0624～0．3744μg范围内，峰面积与进样量呈良好的线性关系。
2．4 提取溶剂和提取方法的选择取防风药材，粉碎，过1号筛。准确称取防风粗粉，每份10％，分别以10倍量75％乙醇、水为溶剂，回流提取2次，每次1小时，或超声波提取2次，每次0．5小时，提取液滤过，以提取用溶剂调节体积，使成每lml含0．
表1 提取溶剂及提取方法的选择
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提取溶液 提取方法 升麻苷 5—0－甲基维斯 总苷(%) 总苷提取率(%) 含量(%) 阿米醇苷含量(%) |
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75％乙醇 回流提取 0.46 0.22 0.68 98.55 超声提取 0.46 0.20 0.66 95.65 水 回流提取 0．16 0．20 0．36 52．17 超声提取 0．16 0．18 0．34 49．28 药典法 0．47 0．22 0．69 — |
2．5正交试验优选防风的提取工艺 提取工艺以醇浓度、乙醇用量、超声提取时间、提取次数为因素，按4因素3水平 L9(34)进行正交试验。因素水平表见表2。
表2 正交因素水平表
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因素水平 醇浓度(％) 醇用量(倍) 超声时间(min) 提取次数(次) A B C D |
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l 95 6 15 1 2 75 8 30 2 3 |
根据正交表，按各因素－水平提取，提取液测定其中的升麻苷及5—0－甲基维斯阿米醇苷的含量，以两者之和的总苷为指标，考察各因素对总苷提取率的影响，结果见表3。
表3 正交试验结果
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序列 A B C D 升麻苷(%) 5—0－甲基维斯阿米醇苷含量(%) 总苷(%) |
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l 4 2 1 2 3 0．43 0．20 0．63 5 2 2 3 1 0．42 0．18 0．60 6 2 3 1 2 0．42 O．17 0．59 7 8 3 9 3 3 2 1 0．33 O．14 0．47 总苷IJ 1．89 1．71 1．61 1．63 总苷ⅡJ1．82 1．71 1．75 1．76 总苷ⅢJ1．45 1．74 1．80 1．77 ⅠJ 0．63 0．57 0．54 0．54 ⅡJ 0．61 0．57 0．58 0．59 ⅢJ 0．48 0．58 0．60 0．_59 |
由表3正交试验结果可知，以总苷为指标，各因素的主次关系为：A>C>D>B，最佳水平为A1B
2．6工艺的验证试验取防风药材粗粉50％，共3份，分别置超声波提取器，加入6倍量75％7,醇，超声提取2次，每次30分钟，提取液滤过，测定其中的升麻苷、5-0-甲基维斯阿米醇苷的含量，平均分别为：0．46％、0．21％，总苷为0．67％，试验结果表明，以此方法提取防风中的有效成分，对总苷的提取率高，平均为97％。
3 讨论
3．1防风中的色原酮类成分，其水溶性小，因此，以水为溶媒提取时，无论以回流法或超声波法提取，其提得率低(约为50％)，这就导致了这类成分在制剂中的转移率低下，而醇溶性成分为防风的主要活性成分.
3．2采用超声波法提取防风，未见文献报道。本研究发现，超声波法提取防风，与热回流法提取比较，两者对色原酮类成分的提取率几无差异。采用超声波法提取，药材在提取过程中温度会逐渐升高，即超声波的热效应，可以增加有效成分的提出，且提取时间短，节约能源。
3．3本研究仅对防风中的色原酮类活性成分的提取工艺进行了初步研究。防风含多类活性成分，以醇为溶媒可以将其中的脂溶性成分较为完全地提取，但水溶性的多糖类成分则难以提出，而水溶性多糖也是防风的活性成分之一，具有提高免疫等作用。因此，防风在提取醇溶性成分后，对残留在其中的多糖等水溶性成分，还需作进一步的研究。
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