中医药具有多靶点、多途径的整体调节作用以及副作用小、价廉等独特优势,在提高艾滋病救治水平方面得到国际医学界的注目。中药扶正排毒片是河南中医学院艾滋病防治专家组长期在临床实践中总结出来的经验方,由西洋参、黄芪等13味中药组成,功能益气养阴、健脾解毒。在对河南省艾滋病高发地区HIV感染者的干预治疗中,该药体现了有较好的临床应用基础。
本研究采用国际先进的体外筛选抗HIV药物的双荧光素酶报告基因测试细胞株(MARBLE cells)观察扶正排毒片水提取物的体外抗HIV作用,为该药的药效学研究和组方优化研究提供实验依据。
以MARBLE双荧光素法检测扶正排毒片水提取物对HIV-1野生毒株HXB2的抑制作用,结果表明中药扶正排毒片水提取物在12.5~200μg·μL-1浓度范围内对HIV-1的抑制率均大于10%;在药物浓度为50μg·μL-1时对HIV-1抑制率最高,达34.54%。阳性对照药AZT的抗HIV-1作用明显,其CC50值为500μg·mL-1,IC50值为0.1μg·mL-1。
目前,常用的体外筛选抗HIV药物的细胞株为MT4,由于MT4细胞表面的CD4受体能够与HIV特异性的结合,在MT4细胞培养中表现为细胞融合形成合胞体,以HIV-1病毒诱导细胞合胞体的产生为评价药效的指标。但由于药物本身的细胞毒性影响,使得用MT4细胞株作为筛选平台的抗HIV检测结果出现一定的偏移。
中药扶正排毒片益气养阴、健脾解毒,适用于气阴亏虚、内蕴热毒型HIV感染者的临床治疗。在河南驻马店等艾滋病高发地区进行的该药对HIV感染者的治疗结果显示:扶正排毒片对无症状HIV感染者的CD4+和CD4+/CD8+有稳定作用,对部分病人的血浆病毒载量有较好的抑制作用。
本实验采用国际先进的双荧光素酶报告基因测试细胞株(MARBLE-cells)观察扶正排毒片水提取物的体外抗HIV作用,确定其具有较为明显的抗HIV作用。阳性对照药AZT的CC50值为500μg·mL-1,IC50值为0.1μg·mL-1的结果验证了本筛选方法的可行性及可信度。
20世纪90年代以来,抗艾滋病病毒药物有了突飞猛进的发展,HIV复制过程中有3个由病毒基因编码的复制关键酶,即逆转录酶、蛋白酶及整合酶,均为发展抗艾滋病病毒药物的重要靶点。中药通过多靶点、多途径的整体调节,抑制外源DNA的插入,清除已整合的外源cDNA,诱导DNA异常的细胞凋亡,将在艾滋病防治中发挥重要作用。扶正排毒片的抗HIV作用机理及其作用环节有待进一步深入研究。(中国中医药报 河南中医学院学报 联合主办)
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