眼血散及其拆方对兔积血导致增殖性玻璃体视网膜病变防治作用的比较研究

    增殖性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy，PVR)是一类引起视力障碍甚至失明的严重眼病，而玻璃体积血则是引起PVR的主要原因之一。任何原因致使视网膜葡萄膜血管或新生血管破裂，血液流出并聚积于玻璃体腔内，都可形成玻璃体积血，积血日久不愈则常可引起PVR等严重并发症，所以玻璃体积血的治疗效果与PVR的形成和发展密切相关。

以祛瘀化痰法组方的眼血散方，是经临床验证治疗玻璃体积血的有效方，根据十余年的临床观察与实验研究，证明本方具有促进玻璃体积血吸收，抑制眼内增殖性改变的作用，能有效防治因玻璃体积血导致的PVR。为进一步了解祛瘀、化痰及祛瘀化痰法对防治积血所致PVR的作用进行了初步的拆方研究，现报道如下。

1 实验材料

1．1 实验动物健康成年日本大耳白兔24只，体重2．O～2．5kg，雌雄不拘，由华中科技大学实验动物中心提供。饲养5天后无不良反应，开始实验。

1．2 药品及n试剂祛瘀化痰(眼血散全方)药物组成：水蛭、昆布、三七、葛根、夏枯草、法半夏、茯苓、归尾等。经湖北省中医院制剂中心将上方煎汁并水煮醇沉，浓缩为1g／ml。祛瘀组药物组成：水蛭、三七、葛根、归尾等；化痰组药物组成：昆布、夏枯草、茯苓、法半夏等。同法分别将②③两组药物浓缩为0．5g／ml。蒸馏水由湖北中医学院实验中心提供。主要试剂兔IL-6及兔bFGF的ELISA试剂盒：森雄生物制剂公司。

2  实验方法

2．1 动物分组将24只兔随机抽取4只(8只眼)作为正常对照组。其余20只(40只眼)造成双眼玻璃体积血模型，并随机分成模型对照组、祛瘀化痰(全方)治疗组、祛瘀(拆方。)治疗组、化痰(拆方：)治疗组，每组5只(10只眼)。

2．2  玻璃体积血模型制作参照Regnah(1970年)玻璃体注血法。2．3给药方法造模后24小时开始给药。正常、模型两组每天以蒸馏水4ml／kg灌胃，1次／日；全方组以眼血散全方灌胃，4ml／kg,1次／日；拆方组分别以祛瘀方和化痰方灌胃，4ml／kg，1次／日，共6周。

2．4 观察指标及检测

2．4．1 玻璃体及眼底观察造模后24小时开始，每周用直接检眼镜观察玻璃体混浊情况，并按Forrester5级分类法记录。

2．4．2  玻璃体液IL-6、bFGF测定给药6周后空气栓塞处死动物，迅速抽取玻璃体液0．5ml／眼5000r／min离心5分钟后，立即贮存于-20℃待测。采用双抗夹心酶联免疫法(ELISA法)检测，具体操作按试剂盒说明进行。

2．5 统计学处理采用SPSS软件包进行数据分析，两两比较用g检验，频数资料用秩和检验。

3  结果

3．1  玻璃体混浊情况比较见表1。

  表1    给药6周后各组玻璃体积血分级(n)

    模型组有2只眼因感染造成全眼球炎未列入观察范围。祛瘀组有1只眼因损伤晶状体造成白内障亦未列入观察范围。

与空白组比较*P<0．05，**P<0．01；与模型组比较△P<0．05，△△P<0．01；与全方组比较#P<0．05，##P<0．01(下同)

3．2玻璃体中bFGF、IL-6含量比较见表2。

表2  给药6周后各组玻璃体中bFGF、IL-6含量(X(-)±s)

4  讨论

    根据中医理论，玻璃体积血多属“暴盲”、“云雾移睛”、“视瞻昏渺”等范畴，其主要病机是血溢络外，瘀血积聚。离经之血即为瘀血，血水同源，血不行则水停，水湿停留，聚而成痰，痰瘀互结，上蒙清窍。故增殖性玻璃体视网膜病变即是“因瘀致痰，痰瘀互结”之证，治疗则应以祛瘀化痰立法。眼血散方中水蛭破血逐瘀，昆布化痰散结，共为君药；三七、葛根活血通络，助水蛭祛瘀；夏枯草、半夏化痰软坚，助昆布散结共为臣药；而当归尾养血活血，茯苓健脾祛湿，除痰之源，诸药合用，共奏祛瘀化痰之功效。

    本实验结果显示，祛瘀化痰组和祛瘀组、化痰组与模型组相比，玻璃体积血均明显减轻，说明眼血散方能有效清除玻璃体积血；而祛瘀化痰组积血程度显著低于祛瘀组和化痰组，说明眼血散方清除玻璃体积血的作用是祛瘀和化痰两种方法的协同结果。

    现代医学研究证明：玻璃体积血的清除是防治PVR的首要环节，这一过程，有赖于红细胞的溶解，巨噬细胞的吞噬，最终需要血液循环转运出眼外。而巨噬细胞在清除积血的过程中，可产生分泌IL-6、bFGF等多种炎性因子，这些因子又可诱导眼内局部的炎症反应、细胞的移行和增殖，诱导增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)的发生。所以本实验通过观察用药前后玻璃体内bFGF和IL-6因子的变化，来验证各组药物在防治PVR中的不同作用。

    在本实验结果中，造模后各组玻璃体中bFGF和IL-6的含量均比正常组明显升高，说明bFGF和IL-6在含有积血的玻璃体中维持了高表达，这可能是玻璃体积血容易引起 PVR的原因之一。而用药后祛瘀化痰(眼血散全方)组和祛瘀(拆方)组、化痰(拆方)组中bFGF和IL-6的含量均低于模型组，说明各治疗组均能抑制bFGF和IL-6的水平，祛瘀化痰组对bFGF和IL-6的作用又明显优于祛瘀组、化痰组，说明祛瘀化痰合法防治积血所致PVR的效果明显优于单纯祛瘀法或化痰法，以祛瘀化痰为法的眼血散全方是防治积血所致PVR的有效方剂。

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