生物技术在现代中药材生产领域的应用及应注意的问题（一）

生物技术已经在现代中药材生产领域得到了广泛应用，但中药材临床疗效的发挥，有赖于其物质组成与中医理论的指导。生物技术在中药材生产领域的应用，应以稳定和提高临床疗效为指导原则。本文对生物技术在现代中药材生产领域的应用进行了综述，并提出了应注意的问题。 一、生物技术在现代中药材生产领域的应用概况生物技术在中药材种质质保存与鉴定、育种、种苗与活性成分工业化生产等领域用途广泛，进展显著。 1．用于中药材种质保存与鉴定 (1)中药材种质保存 种质是长期自然选择与人工选择的产物，是进行作物品种改良的基础。中药材野生资源正逐步减少，种质保存迫在眉睫。中药材种质保存有两种基本形式：就地保存与异地保存。异地保存主要为种质圃、养殖园的迁地保存和试管保存。通过置地种植或设园养殖延续保存，适用于一般种质，优良种质仍然会退化；试管保存是通过组织培养在诱导培养基上建立无性系，获得试管植株、愈伤组织或悬浮培养细胞等贮存材料，再对其内部生长因子、外部环境条件进行调控，以达到长期保存的目的。此方式占用空间小，可避免外界害虫、病菌与病毒侵害，不经检疫便可进行种质交换，并可在短期内实现快速繁殖。通过两步冰冻法实现的超低温试管保存技术，更具有长期性和稳定性，已成为种质保存的常规技术。目前，千年健、金钗石槲、绞股蓝等药用植物已实现种质试管保存。 (2)中药材品种鉴定与纯度检验 选育良种是保证中药材质量和提高中药材产量的有力举措。开展良种选育首先要进行品种鉴定，以形态学方法鉴定品种周期较长，并且与环境互作，而依靠生物技术发展起来的各类电泳指纹图谱，多态性丰富，具高度个体特异性和环境稳定性，非常适于品种鉴定。用于中药材品种鉴定的指纹图谱主要有蛋白质电泳指纹图谱和DNA指纹图谱两类。蛋白质电泳指纹图谱涉及的蛋白质包括同工酶和贮藏蛋白，其组成由生物遗传性决定，不受环境影响，所以它们组分上的差异可反映出基因型的不同，因而可作为区别品种的“生化指纹”，并且分辨率高、重复性强、简便快速，通常只需1～2天即可完成品种检测。 DNA指纹图谱直接反映DNA水平上的差异，其技术主要包括限制性片段长度多态性(RFLP)、随机扩增多态性DNA(RAPD)、小卫星DNA、微卫星DNA、扩增片段长度多态性(AFLP)等，其中微卫星 DNA与扩增片段长度多态性 (AFLP)为目前遗传标记研究的热点。 中药材种子质量主要依据纯度与真实性来控制。种子纯度和真实性的传统检验方法是生长测验，费工费时且结果易出现偏差，而采用指纹图谱法进行检验，却具有简便、快速、准确等优点。因此，建立一套中药材种子标准指纹图谱，对于防止伪劣种子流人市场、提高种子质量、促进生产发展意义重大。 (3)道地药材研究 道地性是中药材的特色之一．道地药材形成受三方面因素的推动，即遗传变异、环境饰变与人文作用，但它们对道地药材形成的贡献大小不同，因而道地药材的形成模式有生境主导型、种质主导型、技术主导型、传媒主导型以及多因子关联决定型等。利用生物技术甄别道地药材的形成模式，找出主导因子，是正确认识地道药材优势、发展道地药材生产的前提和关键。如湖南产玉竹根条粗壮、色泽黄亮、柔润，被推崇为道地药材，刘塔斯等人对广东、北京与湖南产玉竹进行了 RAPD分析，聚类分析结果显示，广东、北京产玉竹的遗传距离小且聚为一类，与湖南产玉竹有明显区分。郭兰萍等应用RAPD技术分析了南北苍术的差异，认为其道地性是在遗传和生态两因素长期作用下形成的遗传与化学成分有稳定差异的居群。提取道地药材入药部位中的mRNA，构建 cDNA文库，筛查有用蛋白基因并进行克隆，可建立起我国道地药材的基因储备；同时通过遗传分子标记，找出其道地性遗传分子基础，建立完善的道地性评价的遗传学、分子生物学和天然药物化学指标体系，是促进中药材质量标准现代化的有效途径。

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